文献类型：期刊文章

作　　者：邱聪花[1] 罗蒙[1] 林娟[1] 叶秀云[1] 王国增[1]

QIU Conghua;LUO Meng;LIN Juan;YE Xiuyun;WANG Guozeng(Fujian Key Laboratoiy of Marine Enzyme Engineering,College of Biological Science and Engineering,Fuzhou University,Fuzhou,Fujian 350108,China)

机构地区：[1]福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室,福建福州350108

出　　处：《福州大学学报（自然科学版）》

基　　金：福建省自然科学基金资助项目(2015J05066)

年　　份：2019

卷　　号：47

期　　号：1

起止页码：136-142

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、JST、MR、RCCSE、ZGKJHX、ZMATH、核心刊

摘　　要：以大布苏盐碱湖分离菌Alkalibacterium sp. SL3的DNA为模板,利用PCR扩增α-半乳糖苷酶基因(gal SL3),构建重组质粒pET-22b-gal SL3,转化至大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达重组酶(r Gal SL3).通过镍柱亲和层析分离纯化重组酶,并对纯化的重组酶进行性质研究.研究表明,纯酶r Gal SL3最适pH值为5.5,最适温度为55℃;该酶在pH值5.0～10.0保持90%以上的剩余酶活,在50℃有非常好的热稳定性.在0～1.5 mol·L^(-1)NaCl溶液中该酶的酶活基本不受影响,在3.0 mol·L^(-1)NaCl溶液中有很好的稳定性. Pb^(2+)、Ca^(2+)、Co^(2+)、Li^+、Na^+、K^+、Triton-100和β-mercaptoethanol等对重组酶的活性有明显的促进作用.该酶水解对硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷的Km、vmax和kcat分别为(2.64±0.02)μmol·m L^(-1)、(454.55±0.59)μmol·(mg·min)^(-1)和(347.73±1.27) s^(-1).重组酶可水解蜜二糖和棉籽糖,不能水解瓜尔豆胶.

关 键 词：嗜盐嗜碱菌  Α-半乳糖苷酶 基因克隆 表达  性质分析

分 类 号：Q819[生物工程类]