文献类型：期刊文章

作　　者：梅文枫[1] 朱一平[1] 尹帮旗[1] 许晓刚[1] 方树彬[1]

MEI Wenfeng;ZHU Yiping;YIN Bangqi;XU Xiaogang;FANG Shubin(Immunotherapy Institute of Fujian Medical University,Fuzhou350122,China)

机构地区：[1]福建医科大学免疫治疗研究所,福州350122

出　　处：《福建医科大学学报》

基　　金：福建省产业科技重大研发平台建设项目(2014Y2002);国家科技项目备案(2016L3006);高校产学合作项目(2017Y4006);福建医科大学启航基金(2017XQ1021)

年　　份：2018

卷　　号：52

期　　号：5

起止页码：320-327

语　　种：中文

收录情况：JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的筛选高表达抗PD-1抗体的工程细胞株和较优的基础及补料培养基,并进行代谢分析。方法分别在TPP摇管、摇瓶中通过流加培养的方式,从6株细胞株和5种商业培养基中筛选高表达抗PD-1抗体的GS-CHO细胞株和较优的基础及补料培养基。在流加培养过程中,检测葡萄糖、谷氨酰胺、谷氨酸、乳酸及氨等的浓度变化。同时为分析限制性营养因素,进一步对乳酸、氨及氨基酸代谢进行分析。结果通过TPP摇管初步筛选,显示122和126两株细胞在HyCell CHO培养基中表现最好,表达量分别为1.945和1.989g/L;在摇瓶中进一步验证显示122细胞在6株细胞中的最大活细胞密度图最高,达2.21×107cells/mL,表达量>2g/L。代谢分析发现,乳酸代谢切换和谷氨酸及丙氨酸代谢相关。氨基酸分析发现,蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸等必需氨基酸可能为122细胞株生长和(或)表达限制性成分。结论筛选出高表达抗PD-1抗体的细胞株和较优培养基,同时代谢分析和氨基酸分析为后续细胞培养工艺开发及个性化培养基优化提供理性指导。

关 键 词：GS-CHO细胞  培养基 细胞计数 代谢

分 类 号：R329.24] R341[基础医学类]