文献类型：期刊文章

作　　者：李梦迪[1] 张志萌[1] 董自星[2] 田康明[2] 金鹏[2] 刘晓光[2] 王正祥[1,2]

LI Meng-di;ZHANG Zhi-meng;DONG Zi-xing;TIAN Kang-ming;JIN Peng;LIU Xiao-guang;WANG Zheng-xiang(College of Biotechnology,Tianjin University of Science&Technology,Tianjin 300457,China;Department of Biochemical Engineering,College of Chemical Engineering and Materials Science,TianjinUniversity of Science&Technology,Tianjin 300457,China)

机构地区：[1]天津科技大学生物工程学院,天津300457 [2]天津科技大学化工与材料学院生物化工系,天津300457

出　　处：《食品与发酵工业》

基　　金：天津市高等学校创新团队培养计划"酶与生物催化关键技术"(TD12-5002)

年　　份：2018

卷　　号：44

期　　号：11

起止页码：15-21

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、FSTA、JST、RCCSE、RSC、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：单宁酶在茶饮料和医药等行业的应用受到了许多因素的限制,包括酶学性质研究的缺乏和较高的生产成本等。为此,该研究通过基因工程技术将黑曲霉CICIM F0510的单宁酶基因tah A在毕赤酵母中进行了克隆表达,构建获得了重组酶GS115 (pPIC-tahA)。摇瓶水平上,重组菌的单宁酶酶活为1. 04 U/mL。酶学性质的解析表明,重组酶TahA的最适作用温度和pH值分别为30℃和4. 5;分别在20～50℃和pH值3. 5～5. 0孵育1 h和2 h后,TahA的相对酶活仍能保持在60%以上; Cu^(2+)、Mn^(2+)和K^+对重组酶的活性有明显的促进作用,而Co^(2+)、Fe^(3+)、Ca^(2+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)、Sn^(2+)、EDTA和SDS对其酶活有不同程度的抑制作用;以没食子酸甲酯为底物时,重组酶的Vmax和Km值分别为0. 436μmol/(mL·min)和5. 143 mmol/L。此外,该重组酶还可以水解茶叶提取物中的酯型儿茶素。这些良好的生化特征为重组单宁酶TahA在茶饮料行业中的应用奠定了坚实的基础。

关 键 词：黑曲霉  单宁酶 分子克隆 酶学特征 茶饮料

分 类 号：TQ925]