文献类型：期刊文章

作　　者：胡安妥[1,2] 王娉[1] 张彩霞[1,3] 蔡阳[1,4] 陈颖[1]

HU Antuo;WANG Ping;ZHANG Caixia;CAI Yang;CHEN Ying(Agro-Product Safety Research Center,Chinese Academy of Inspection and Quarantine,Beijing 100176,China;College of Food Science and Engineering,Nanjing University of Finance and Economics,Nanjing 210023,China;College of Food Science and Engineering,Wuhan Polytechnic University,Wuhan 430070,China;Jilin Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Changchun 130062,China)

机构地区：[1]中国检验检疫科学研究院农产品安全研究中心,北京100176 [2]南京财经大学食品科学与工程学院,江苏南京210023 [3]武汉轻工大学食品科学与工程学院,湖北武汉430070 [4]吉林出入境检验检疫局,吉林长春130062

出　　处：《食品科学》

基　　金："十三五"国家重点研发计划重点专项(2016YFD0401102);中国检验检疫科学研究院基本科研业务费项目(2016JK022)

年　　份：2018

卷　　号：39

期　　号：22

起止页码：249-255

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD_E2017_2018、EI、FSTA、IC、JST、RCCSE、RSC、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:建立快速检测和鉴别5类致泻大肠埃希氏菌的多重实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法。方法:根据5类致泻大肠埃希氏菌的11组毒力基因eae、stx1、stx2、ipaH、uidA、estla、estlb、aggR、pic、elt、astA建立多重实时荧光PCR方法,该方法包括A、B 2个反应体系,可分别检测肠致病性大肠埃希氏菌、肠出血性大肠埃希氏菌、肠侵袭性大肠埃希氏菌、肠产毒大肠埃希氏菌、肠聚集性大肠埃希氏菌,优化反应体系的引物、探针浓度以及PCR反应条件,并对该方法的灵敏度和特异性进行检测。结果:11组基因的探针和引物均可特异性地扩增相应的基因片段,A体系检测下限可达到2.6×10~4 copies/反应,B体系检测下限可到达2.2×10~4 copies/反应。结论:本研究所建立的多重实时荧光PCR方法可以对同一样本同时采用A、B 2个反应体系进行检测,不但可以确定待测样本是否为大肠埃希氏菌,而且还能判定其致病型别。为大肠埃希氏菌的临床检测、疾病预防以及爆发溯源等提供参考。

关 键 词：致泻大肠埃希氏菌  多重实时荧光PCR  毒力基因

分 类 号：R378.2]