文献类型：期刊文章

作　　者：田顺立[1] 郑春阳[2,3]

TIAN Shun-li;ZHENG Chun-yang(Department of Health and Medical,Tianjin Medical University General Hospital,Tianjin 300052;School of Basic Medical Sciences,North China University of Science and Technology,Tangshan,Hebei 063000;Robustnique Corporation Ltd.,Tianjin 300384)

机构地区：[1]天津医科大学总医院保健医疗部,天津300052 [2]华北理工大学基础医学院,河北唐山063000 [3]天津强微特生物科技有限公司,天津300384

出　　处：《安徽农业科学》

基　　金：天津市创新平台与人才专项(15PTSYJC00090);天津市科技支撑计划项目(15ZCZDSY00530);天津市科委应用基础与前沿技术研究计划青年项目(15JCQNJC12500)

年　　份：2018

卷　　号：46

期　　号：33

起止页码：71-74

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、RCCSE、普通刊

摘　　要：[目的]在原核表达系统中进行重组人角质细胞生长因子(KGF)的表达及优化。[方法]选取缺失N端23个氨基酸残基的KGF片段作为目的基因,按照大肠杆菌的密码子偏好性,将其进行密码子优化。使用BL21(DE3)菌株表达KGF(ΔN23)、SUMO融合的SUMOKGF(ΔN23)和Fh8-SUMO融合的Fh8-SUMO-KGF(ΔN23),并测试不同表达温度(37、23℃)对KGF(ΔN23)表达结果的影响。[结果]在BL21(DE3)菌株中,37℃表达时KGF(ΔN23),SUMO-KGF(ΔN23)和Fh8-SUMO-KGF(ΔN23)的表达量都较高,其中可溶性蛋白表达量KGF(ΔN23)<SUMO-KGF(ΔN23)<Fh8-SUMO-KGF(ΔN23)。降低诱导温度为23℃后,3种KGF的表达量都显著降低,但是可溶性蛋白的占比显著提高,均接近100%。[结论]降低诱导温度能够促进KGF的可溶性表达,但是总蛋白的表达水平显著下降;与可溶性标签蛋白融合表达能够提高KGF在37℃表达时可溶性蛋白占比,其中融合Fh8-SUMO标签的KGF表达量和可溶性蛋白占比较高。

关 键 词：角质细胞生长因子(KGF)  原核表达系统 密码子优化 融合表达  标签蛋白  

分 类 号：Q813[生物工程类] Q816