文献类型：期刊文章

作　　者：张萌萌[1] 李宝宝[1] 曹瑞勇[1] 黄海峰[1] 张振兴[1] 杨小健[1] 聂鑫[1] 朱姝[1] 王凤阳[1] 杜丽[1]

ZHANG Mengmeng;LI Baobao;CAO Ruiyong;HUANG Haifeng;ZHANG Zhenxing;YANG Xiaojian;NIE Xin;ZHU Shu;WANG Fengyang;DU Li(Key Laboratory of Animal Genetic Engineering of Haikou City,Key Laboratory of Tropical Animal Reproduction&Breeding and Epidemic Disease Reseach of Hainan Province, College of Animal Science and Technology,Institute of Tropical Agriculture and Forestry,Hainan University,Haikou 570228,China)

机构地区：[1]海南大学热带农林学院动物科技学院,海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海口市动物基因工程重点实验室,海口570228

出　　处：《中国畜牧兽医》

基　　金：海南省重大科技计划项目(ZDKJ2016017-01);国家肉羊产业技术体系(CARS-38);中央领导地方科技发展专项资金项目(ZY2017HN07)。

年　　份：2018

卷　　号：45

期　　号：9

起止页码：2401-2408

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：试验旨在克隆和表达羊源性类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,B.pseudomallea)的BPSL1467基因,并对其表达的蛋白进行生物信息学分析。以羊源类鼻疽伯克霍尔德菌(BPHN1株)基因组为模板,参照GenBank中类鼻疽伯克霍尔德菌K96243标准株BPSL1467基因序列设计引物,PCR扩增获得目的基因片段,将所得片段与pET-28a(+)载体连接,构建pET-28a(+)-BPSL1467重组质粒。将鉴定正确的pET-28a(+)-BPSL1467重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,通过IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达产物。使用DNAMAN、ProtParam、SOPMA和Protscale相关生物信息学软件对BPSL1467基因编码的氨基酸序列进行分析。结果显示,本试验成功克隆了462bp的BPSL1467基因,诱导表达重组蛋白大小约为22ku,主要以包涵体的形式存在。BPSL1467蛋白分子式为C763H1209N203O217S6,分子质量为16 890.58u;其不稳定系数为33.95,属于稳定蛋白;理论等电点(pI)为8.85,为碱性蛋白;总平均疏水性(GRAVY)为-0.190,为亲水性蛋白。该蛋白的二级结构中以无规则卷曲和α-螺旋为主。本试验结果为深入研究羊源类鼻疽伯克霍尔德菌的BPSL1467基因的分子作用机理提供了参考依据。

关 键 词：类鼻疽伯克霍尔德菌 BPSL  1467基因  克隆 原核表达 生物信息学分析

分 类 号：S858.26]