文献类型：期刊文章

作　　者：曹琼洁[1] 董菁[1] 李丽[1] 陈晓燕[1] 王教[1] 闫东升[1]

Qiongjie Cao;Jing Dong;Li Li;Xiaoyan Chen;Jiao Wang;Dongsheng Yan(State Key Laboratory of Ophthalmology,Optometry and Vision Science,Eye Hospital of Wenzhou Medical University,Wenzhou 325027,China)

机构地区：[1]温州医科大学附属眼视光医院省部共建眼视光学和视觉科学国家重点实验室,325027

出　　处：《中华眼视光学与视觉科学杂志》

基　　金：国家自然科学基金(81272286);国家自然科学青年基金(81301776)。

年　　份：2018

卷　　号：20

期　　号：9

起止页码：546-551

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSCD、CSCD2017_2018、IC、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:研究microRNA-127(miR-127)在人葡萄膜黑色素瘤细胞中的表达水平及其对细胞增殖的影响。方法:实验研究。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-127在葡萄膜黑色素瘤细胞M23和SP6.5与正常葡萄膜黑色素细胞UM95中的表达水平。细胞实验通过阳离子脂质体介导的方法将miR-127和阴性对照(NC)转染入M23和SP6.5中,并应用细胞增殖实验法(MTS法)和流式细胞技术分别检测细胞增殖能力和细胞周期,采用WesternBlot法检测转染miR-127后细胞周期相关蛋白的表达。另外,通过RT-qPCR检测用表观药物5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-dC)和(或)曲古抑菌素A(TSA)处理后的M23和SP6.5细胞内miR-127的表达水平。MiR-127的表达量及细胞实验各参数在2组间比较采用独立样本t检验。结果:miR-127在M23和SP6.5中的表达水平低于UM95(t=72.2、591.5,P<0.001)。MTS结果显示,在M23和SP6.5细胞中,转染miR-127组相对细胞数目较NC组的100%分别减少至(62.3±4.2)%和(65.4±2.3)%,差异具有统计学意义(t=12.7、21.6,P<0.001)。流式细胞技术分析显示,转染miR-127组处于G0/G1期的M23和SP6.5细胞数量比例明显高于NC组(t=-6.7,P=0.003;t=-9.9,P<0.001),同时处于S期的M23和SP6.5细胞数量比例明显低于NC组(t=8.6,P=0.001;t=12.7,P<0.001)。WesternBlot结果表明miR-127可明显降低M23和SP6.5细胞内磷酸化Rb蛋白的表达水平(t=22.2、15.6,P<0.001)。此外,miR-127在M23和SP6.5细胞中的表达可被5-Aza-dC和TSA诱导上调(P<0.05)。结论:miR-127通过抑制细胞周期而抑制人葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖,并可被DNA甲基化和组蛋白乙酰化表观遗传机制调控。

关 键 词：葡萄膜黑色素瘤 microRNA-127  细胞周期 细胞增殖 表观遗传调控

分 类 号：R739.7]