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太子参抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的活性部位筛选及作用机制研究
Study on the Screening of Active Fractions of Pseudostellaria heterophylla Against Myocardial Hypoxia/reoxygenation Injury and Its Mechanism
文献类型:期刊文章
YANG Xin;ZHANG Jinjuan;WAN Lei;DENG Lianli;LIAO Shanggao;HE Xun(School of Pharmacy,Guizhou Medical University,Guiyang 550025,China;School of Basic Medicine,Guizhou Medical University,Guiyang 550025,China;National Engineering Research Center of Miao’s Medicines&Engineering Research Center for the Development and Application of Ethnic Medicine and TCM(Ministry of Education),Guiyang 550004,China;Key Lab of Optimal Utilization of Natural Medicinal Resources,Guizhou Medical University,Guiyang 550004,China;School of Medicine and Health Management,Guizhou Medical University,Guiyang 550025,China)
机构地区:[1]贵州医科大学药学院,贵阳550025 [2]贵州医科大学基础医学院,贵阳550025 [3]国家苗药工程技术中心及教育部民族药与中药开发应用工程研究中心,贵阳550004 [4]贵州医科大学天然药物优效利用重点实验室,贵阳550004 [5]贵州医科大学医药卫生管理学院,贵阳550025
基 金:国家自然科学基金资助项目(No.81360635;81660570)
年 份:2018
卷 号:29
期 号:14
起止页码:1958-1964
语 种:中文
收录情况:AJ、BDHX、BDHX2017、CAS、CSA-PROQEUST、IC、IPA、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的:筛选太子参抗心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的活性部位,并探讨其作用机制。方法:太子参药材水提物经D101大孔吸附树脂柱以水-乙醇梯度洗脱,得水洗脱部位(Fr.A)、30%乙醇洗脱部位(Fr.B)、50%乙醇洗脱部位(Fr.C)、95%乙醇洗脱部位(Fr.D)。采用化学缺氧法以连二亚硫酸钠复制大鼠H9c2心肌细胞H/R损伤模型,采用MTS法检测经太子参各部位低、中、高剂量(Fr.A、Fr.B、Fr.C低、中、高剂量均分别为750、1 500、3 000 mg/L,Fr.D低、中、高剂量分别为5、10、20 mg/L)预处理后的细胞存活率,筛选活性最强部位。分别采用微板法、硫代巴比妥酸比色法、WST-1法测定经太子参活性最强部位低、中、高剂量预处理后细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性以及细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用蛋白质印迹法检测细胞胱天蛋白酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果:经4个部位预处理后,Fr.A高剂量组,Fr.B高剂量组,Fr.C各剂量组的细胞存活率均较模型组显著升高(P<0.05或P<0.01),且以Fr.C的活性最强。经Fr.C预处理后,各剂量组细胞培养液中LDH活性,中、高剂量组细胞内MDA含量、细胞凋亡率及Caspase-3和Bax蛋白的表达量均较模型组显著下降(P<0.05或P<0.01);高剂量组细胞内SOD活性以及中、高剂量组细胞Bcl-2蛋白的表达量均较模型组显著升高(P<0.05)。结论:太子参Fr.A、Fr.B、Fr.C部位均具有抗心肌细胞H/R损伤的作用,其中以Fr.C的活性最强;Fr.C抗心肌细胞H/R损伤作用可能与其改善细胞的氧化应激状态,提高细胞清除氧自由基的能力,降低细胞脂质过氧化程度,抑制细胞凋亡,上调Bcl-2蛋白表达以及下调Caspase-3、Bax蛋白表达有关。
关 键 词:太子参 活性部位 大鼠H9c2心肌细胞 缺氧/复氧损伤 氧化应激 细胞凋亡 胱天蛋白酶3 B细胞淋巴瘤/白血病-2 Bcl-2相关X蛋白
分 类 号:R965.1] R285[药学类]
参考文献:
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