文献类型：期刊文章

作　　者：吴张松[1] 朱红霞[2] 罗志强[1] 潘婉淳[1] 杨帆[1] 林欣燕[1] 朱艳霞[1]

Wu Zhang-song;Zhu Hong-xia;Luo Zhi-qiang;Pan Wan-chun;Yang Fang;Lin Xin-yan;Zhu Yan-xia(Shenzhen Key Laboratory for Anti-ageing and Regenerative Medicine,Health Science Center,Shenzhen University,Shenzhen 518060,Guangdong Province,China;Emergency Department,Xiaogan Maternity&Child Healthcare Hospital,Xiaogan 432100,Hubei Province,China)

机构地区：[1]深圳大学医学部,深圳抗衰老与再生医学重点实验室,广东省深圳市518060 [2]孝感市妇幼保健院急诊科,湖北省孝感市432100

出　　处：《中国组织工程研究》

基　　金：国家自然科学基金(81301597)；深圳新兴战略产业发展专项资金(JCYJ20150525092940984/JCYJ20160422090807181)；广东省大学生科技创新培育专项项目(pdjh2017b0442)

年　　份：2018

卷　　号：22

期　　号：2

起止页码：254-260

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSA-PROQEUST、EMBASE、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：背景:越来越多研究表明,组织工程化心肌细胞片层可为心肌梗死后的细胞修复提供一种可靠的治疗方法。目的:以壳聚糖-胶原电纺膜作为支撑膜、脂肪干细胞作为种子细胞,构建"三明治"样多细胞片层。方法:制备壳聚糖与Ⅰ型鼠尾胶原质量比分别为7∶3、5∶5的壳聚糖-胶原电纺生物膜。将第4代脂肪干细胞接种于温敏培养皿培养3 d,分别加入两种壳聚糖-胶原电纺生物膜,20℃培养15 min;待细胞片边缘卷起后,将电纺膜及细胞片层一同移至另一脂肪干细胞生长完全融合的温敏培养皿表面,有细胞层一面朝上,培养30 min后,加入心肌细胞培养基进行培养。培养2周后,多光子显微镜观察细胞状态,免疫细胞化学、Western blot及流式细胞仪检测细胞心肌组织特异性肌钙蛋白Tn I和缝隙连接蛋白Cx43的表达,实时定量PCR仪检测心肌细胞特异性基因表达。结果与结论:(1)细胞状态:7∶3壳聚糖-胶原电纺膜不能为细胞增殖提供足够的空间,5∶5壳聚糖胶原膜能为脂肪干细胞的附着和结构塑形提供更好的支持;7∶3壳聚糖-胶原电纺膜组死细胞多于5∶5壳聚糖-胶原电纺膜组;(2)Tn I、Cx43蛋白表达:5∶5壳聚糖-胶原电纺膜组细胞Tn I、Cx43蛋白表达多于7∶3壳聚糖-胶原电纺膜组(P<0.05);(3)心肌细胞特异性基因表达:5∶5壳聚糖-胶原电纺膜组细胞α-sk A、β-MHC、Tn I、Cx43、ANP、GATA-4和Nkx2.5 m RNA表达均高于7∶3壳聚糖-胶原电纺膜组;(4)结果表明:5∶5壳聚糖-胶原电纺膜作为支架有利于脂肪干细胞的增殖与分化,更适宜构建"三明治"样细胞片层。

关 键 词：壳聚糖  干细胞 心肌梗塞 组织工程  

分 类 号：R318[生物医学工程类]