文献类型：期刊文章

作　　者：吴尚蓉[1] 郑勇[1] 卓儒红[2] 何柳[1] 胡成俊[1]

Wu Shangrong;Zheng Yong;Zhuo Ruhong;He Liu;Hu Chengjun(Department of Anatomy and Embryology, Wuhan University School of Basic Medical Sciences,Wuhan 430071, China;Department of Integrated Medicine,Zhongnan Hospital of Wuhan University, Wuhan 430071, China)

机构地区：[1]武汉大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系 [2]武汉大学中南医院综合医疗科,武汉430071

出　　处：《中国组织化学与细胞化学杂志》

基　　金：国家自然科学基金(81071269;81402296)

年　　份：2018

卷　　号：27

期　　号：1

起止页码：1-7

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSCD、CSCD_E2017_2018、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的探究和分析自噬在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)复制性衰老过程中的作用和可能的调控机制。方法采用全骨髓细胞贴壁法获得大鼠BMSCs,体外连续传代培养至第6代(passage 6,P6),分别用自噬抑制剂巴佛洛霉素A1(bafilomycin A1,Ba F1)和自噬激活剂雷帕霉素(rapamycin,Rap)处理P6 BMSCs。q PCR和Western blot分析细胞自噬活性和衰老相关基因表达的改变,DCFH-DA染色法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量。结果与增殖活跃的P2 BMSCs相比,P6 BMSCs增殖停滞,Brdu掺入率极低,SA-β-gal染色阳性率高达90%,且P6 BMSCs的p21Waf1和p16ink4a m RNA表达水平明显升高。在P6 BMSCs,ATG12 m RNA表达水平和LC3II/LC3I的比值升高,细胞内ROS含量也增加。对P6 BMSCs采用Ba F1处理阻断自噬流后,p21Waf1和p16ink4a m RNA表达水平降低,ROS含量增加;用Rap处理后,ATG12 m RNA表达水平和LC3II/LC3I蛋白比值均明显升高,且p21Waf1和p16ink4a m RNA表达水平升高,ROS含量降低。结论通过体外连续培养,P6 BMSCs进入衰老状态;自噬可能通过促进衰老相关基因表达调节BMSCs的复制性衰老。

关 键 词：骨髓间充质干细胞 复制性衰老  自噬 活性氧

分 类 号：R329]