文献类型：期刊文章

作　　者：刘立兵[1,2] 王建昌[1,2] 经美[3] 王金凤[1,2] 袁万哲[3]

LIU Li bing;WANG Jian chang;JING Mei;WANG Jin feng;YUAN Wan zhe(Center of Inspection and Quarantine, Hebei Entry Exit Inspection and Quarantine Bureau, Shijiazhuang 050051,China;Hebei Academy of Science and Technology for Inspection and Quarantine,Shijiazhuang 050051,China;College of Veterinary Medicine, Hebei Agricultural University, Baoding 071001,China)

机构地区：[1]河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心,石家庄050051 [2]河北省检验检疫科学技术研究院,石家庄050051 [3]河北农业大学动物医学院,保定071001

出　　处：《中国畜牧兽医》

基　　金：河北省自然科学基金青年项目(C2017325001);猪主要繁殖障碍性疫病防控关键技术研究(16226604D)

年　　份：2017

卷　　号：44

期　　号：11

起止页码：3320-3326

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：试验旨在建立一种简单、快速检测猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)的重组酶聚合酶(recombinase polymerase amplification,RPA)检测方法,为中国PPV的防控和诊断提供一种新的、可靠的技术支持。本研究基于PPVVP2基因的保守序列,设计合成1对RPA引物探针,通过对反应时间的优化,建立38℃恒温水浴锅检测PPV的RPA方法。结果表明,所建立的RPA方法在38℃水浴锅中恒温反应30min,能够特异性的检测PPV;以重组质粒pPPV-VP2作为模板,RPA的检测限为102拷贝,同本研究中应用的实时荧光定量PCR方法检测限一致,比普通PCR方法高100倍;RPA方法对疑似PPV感染临床样品的阳性检出率为82.6%,略低于实时荧光定量PCR的检出率(86.9%),明显高于普通PCR的阳性检出率(66.7%)。本研究建立的RPA方法操作简单、反应快速,结果确实可靠,适用于PPV的快速检测。

关 键 词：猪细小病毒(PPV)  等温扩增  聚合酶重组酶扩增  快速检测  

分 类 号：S852.659.2]