文献类型：期刊文章

作　　者：贾盈露[1] 丁国芳[1,2] 杨最素[1] 余方苗[1] 郑媛媛[1] 吴宗泽[1] 陈锐[1]

JIA Yinglu;DING Guofang;YANG Zuisu;YU Fangmiao;ZHENG Yuanyuan;WU Zongze;CHEN Rui(Key Engineering Research Centers of Marineorganisms Medical Products, School of Food Science and Medical,Zhejiang Ocean University, Zhoushan 316022, China;Marine Fisheries Research Institute of Zhejiang, Zhoushan 316021, China)

机构地区：[1]浙江海洋大学食品与医药学院,浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心,浙江舟山316022 [2]浙江省海洋水产研究所,浙江舟山316021

出　　处：《食品科学》

基　　金：国家自然科学基金青年科学基金项目(81001393);2015年度国家星火计划项目(2015GA700044);国家海洋重大计划项目(2015862);浙江省科技厅重大专项(2013C03036);浙江省自然科学基金项目(LS15H30001);浙江省自然科学基金青年资金项目(LQ16H300001);舟山市科技计划项目(2015C31012)

年　　份：2017

卷　　号：38

期　　号：12

起止页码：27-35

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD_E2017_2018、EI、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：探讨双齿围沙蚕酶解多肽制备的关键技术及其对肺癌A549细胞的作用。以增殖抑制率为指标,确定最佳酶种并根据单因素试验和正交试验确定其最佳酶解工艺。经超滤获得1~3 ku的酶解液,通过阴离子色谱、凝胶过滤色谱和制备色谱对其进行进一步的分离纯化。采用四甲基偶氮唑蓝法测定沙蚕多肽PAP对肺癌A549细胞的增殖抑制率并通过倒置显微镜、吖啶橙/溴化乙锭荧光染色及Hoechst荧光染色观察其细胞形态的变化。实验结果表明最佳酶种是碱性蛋白酶,其最佳酶解条件为:酶解温度50℃、pH 11、料液比1∶1(g/mL)、酶解时间6 h、加酶量300 U/g。经纯化获得的多肽命名为PAP,其氨基酸序列为Ile-Glu-Pro-Gly-Thr-Val-Gly-Met-Met-Phe,且PAP对A549细胞的作用呈时间与剂量依赖关系,作用后细胞出现了凋亡的形态学特征。因此,PAP能明显抑制肺癌细胞A549增殖,可以诱导其发生凋亡而发挥抗肿瘤作用。

关 键 词：双齿围沙蚕 多肽 抗肿瘤 A549细胞 细胞凋亡  

分 类 号：R734.2]