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圆斑蝰蛇泰国亚种(Vipera russe lli siamensis)蛇毒凝血因子激活剂的纯化及部分特性研究
Purification and Partial Properties of Blood Coagulation Factor Ⅹ Activator from the Venom of Vipera Russelli Siamensis
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]福建医科大学蛇毒研究所,福州350004
基 金:福建省卫生厅青年科研基金资助项目 (2 0 0 2 -1-1)
年 份:2002
卷 号:36
期 号:3
起止页码:242-246
语 种:中文
收录情况:JST、ZGKJHX、普通刊
摘 要:目的 从圆斑蝰蛇泰国亚种蛇毒中分离纯化凝血 因子 (F )激活剂并研究其部分特性。 方法 采用离子交换柱层析和凝胶过滤等方法进行分离纯化 ,以血液凝固时间及发色底物 (S- 2 2 2 2 )进行活性鉴定和温度、p H值、蛋白酶抑制剂对活性的影响 ,SDS- PAGE进行分子量、等电点及纯度测定 ,苯酚 -硫酸法及间苯二酚 -盐酸法测定糖含量。 结果 所得促凝组分 1 能特异性地活化牛 F ,从而水解 S- 2 2 2 2酰胺键。SDS- PAGE呈现单一蛋白带 ,分子量为 6 1.1± 1.5 k D(还原 ) ,6 0 .4± 1.9k D(非还原 )。等电点为 p H=8.0 0± 0 .0 6。含中性己糖 12 .4 %±0 .5 % ,唾液酸 0 .12 %± 0 .0 2 %。在 5 0℃以下稳定 ,最适 p H为 7.0~ 8.2。可被金属蛋白酶抑制剂 EDTA- Na2 完全抑制 ,二硫苏糖醇 (DTT)及 L -半胱氨酸部分抑制 ,不受胰蛋白酶抑制剂抑肽酶抑制。 结论 从圆斑蝰蛇泰国亚种蛇毒分离纯化的 F 激活剂是一种碱性糖蛋白 ,属于 Ca2 + 依赖性的金属蛋白酶。
关 键 词:圆斑蝰蛇 泰国亚种 凝血X因子激活剂 钙调蛋白 离子交换柱层析 凝胶过滤 金属蛋白酶
分 类 号:R284[中药学类]
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