文献类型：期刊文章

作　　者：肖靖淞[1] 侯贵钟[1] 赛燕[2] 张爱华[1] 曹佳[2]

XIAO Jingsong;HOU Guizhong;SAI Yan;ZHANG Aihua;CAO Jia(Department of Toxicology,College of Public Health,Guizhou Medical University,Guiyang,Guizhou Province,550025;Institute of Toxicology,Faculty of Military Preventive Medicine,Army Medical University(Third Military Medical University),Chongqing,400038,China)

机构地区：[1]贵州医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室,贵阳550025 [2]陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系毒理学研究所,重庆400038

出　　处：《第三军医大学学报》

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81473006)~~

年　　份：2019

卷　　号：41

期　　号：8

起止页码：778-785

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2019_2020、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨PARP-1在鱼藤酮(rotenone)诱导大鼠PC12细胞线粒体DNA(mtDNA)损伤中的作用。方法不同浓度(0、0.1、0.5、1.0、1.5μmol/L)鱼藤酮处理PC12细胞,TaqMan探针法PCR检测mtDNA缺失,qPCR法检测mtDNA拷贝数,Western blot检测PARP-1蛋白在PC12细胞内和线粒体内的表达水平。PARP-1选择性抑制剂PJ34预处理鱼藤酮染毒的PC12细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖活力,TaqMan探针法PCR检测mtDNA缺失,qPCR法检测mtDNA拷贝数,四甲基罗丹明乙酯(TMRM)染色检测线粒体膜电位,DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果 TaqMan探针法PCR和qPCR法检测结果显示,与对照组(0μmol/L鱼藤酮)比较,鱼藤酮处理可引起PC12细胞线粒体DNA缺失增加和线粒体DNA拷贝数降低(P<0.05)。同时,细胞和线粒体内的PARP-1蛋白表达被激活,Western bolt检测结果显示,PARP-1蛋白表达水平随鱼藤酮浓度增加而增加。与鱼藤酮单独处理组比较,PJ34预处理可提高鱼藤酮染毒引起的PC12细胞的活力下降(P<0.05),并降低线粒体DNA缺失和提高线粒体DNA拷贝数水平(P<0.05)。TMRM染色结果显示,PJ34预处理后线粒体膜电位水平提高(P<0.05);DCFH-DA探针检测结果显示,PJ34预处理后细胞内ROS水平下降(P<0.05)。结论鱼藤酮可诱导PC12细胞线粒体DNA的损伤,激活PC12细胞和线粒体内PARP-1蛋白的表达,PARP-1选择性抑制剂PJ34对鱼藤酮诱导的多巴胺神经元PC12细胞线粒体DNA的损伤具有保护作用。

关 键 词：鱼藤酮 帕金森病 PARP-1 PJ34 线粒体DNA

分 类 号：R742.5]