文献类型：期刊文章

作　　者：樊廷俊[1] 汪小锋[1]

机构地区：[1]青岛海洋大学海洋生命学院海洋生物系,青岛266003

出　　处：《生物化学与生物物理学报》

基　　金：国家教育部高等学校骨干教师资助计划资助 (No .16 0 0 0 4)

年　　份：2002

卷　　号：34

期　　号：5

起止页码：589-594

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RSC、SCI-EXPANDED(收录号：WOS:000178180200010)、SCIE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以中国对虾 (Penaeuschinensis)的血淋巴为材料 ,利用凝胶过滤和离子交换等方法 ,对酚氧化酶 (phe noloxidase ,E .C .1 .1 0 .3.1 )进行了分离纯化和生物化学性质研究。实验发现 ,酚氧化酶原 (prophenoloxidase)的分子量为 87.5kD左右 ,在实验操作过程中极易发生降解或自身降解 ,变成有活性的大小约 77kD的酚氧化酶 ,1 0g/LSDS可使该酶原全部被激活而成为有活性的酚氧化酶。以L 二羟苯丙氨酸 (L DOPA)为特异性底物对酚氧化酶活性进行研究发现 ,其最适pH值为 6 .0左右 ,最适温度为 4 0℃ ,Km 值约为 1 .99mmol/L。利用多种氧化酶抑制剂对酚氧化酶纯化样品的酶活性进行研究 ,发现抗坏血酸 (ascorbicacid)、半胱氨酸 (cysteine)和二硫苏糖醇(dithiothreitol)对酚氧化酶活性具有很强的抑制作用 ,硫脲 (thiourea)对酚氧化酶活性也具有较强的抑制作用 ,而酚氧化酶对苯甲酸 (benzoicacid)、柠檬酸 (citricacid)和亚硫酸钠 (sodiumsulfite)不敏感 ,而且该酶对酪氨酸等单酚还具有高特异性的酚氧化酶活性 ,表明它可能是一种酪氨酸酶型的酚氧化酶 ;此外 ,该酶对EDTA和金属离子非常敏感 ,其活性能被Cu2 +强烈抑制 ,被Mg2 +强烈激活 ,表明该酶很可能是一种金属酶 (metalloenzyme)

关 键 词：中国对虾 酚氧化酶 分离纯化 生物化学性质 L-DOPA 酪氨酸酶  金属酶

分 类 号：Q554]