文献类型：期刊文章

作　　者：陈嘉雯[1] 覃直然[1] 彭淑莹[1] 余健海[1] 何晓恩[1] 谢茜[1] 朱利[1] 肖维威[1] 赵卫[1]

CHEN Jia-wen;QIN Zhi-ran;PENG Shu-ying;YU Jian-hai;HE Xiao-en;XIE Qian;ZHU Li;XIAO Wei-wei;ZHAO Wei(Biosafety level 3 Laboratory,School of Public Health,Southern Medical University,Guangzhou,Guangdong 510515,China)

机构地区：[1]南方医科大学公共卫生学院三级生物安全实验室,广东广州510515

出　　处：《现代预防医学》

基　　金：国家自然科学基金(No.31470271;81730110)

年　　份：2018

卷　　号：45

期　　号：22

起止页码：4135-4138

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、IC、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的建立非洲型寨卡病毒(ZIKV)实时荧光定量PCR检测技术。方法人工合成非洲型ZIKV E基因上2 074～2 210 bp的保守片段,克隆到pUC57载体作为非洲型ZIKV质粒标准品;以108～102 copies/μl共7组质粒标准品制作标准曲线;设计的上游引物为5'-TCAAAGATGATGTTGGAGCT-3'、下游引物5'-CCTCTCACAGTGGCYTCA-3'、探针5'FAM-CCACCATTTGGGGATTCTTACATTGTC-BQ1-3',采用实时荧光定量PCR检测其特异性、灵敏度及重复性。结果非洲型ZIKV质粒标准品浓度为76.61 ng/μl;以非洲型ZIKV质粒标准品制作标准曲线,在2.47×(108～102)copies/μl之间有较好线性关系,Rsq为1;能特异检测出非洲型ZIKV质粒标准品,与登革病毒1～4、亚洲型ZIKV质粒标准品、HCV-1b病人血清RNA无交叉反应,检测限为2.47×101copies/μl。结论本研究建立了可用于非洲型ZIKV实验室检测的实时荧光定量PCR技术。

关 键 词：非洲型寨卡病毒  实时荧光定量PCR E基因

分 类 号：R183.5]