文献类型：期刊文章

作　　者：赵欢[1,2] 郭娟[1] 唐其[3] 郭兰萍[2] 黄璐琦[2] 马小军[4]

ZHAO Huan,GUO Juan,TANG Qi,GUO Lan-ping,HUANG Lu-qi,MA Xiao-jun(1. Flow Station of Post-Doctoral Scientific Research,China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China;2.Breeding Base of State Key Laboratory of Dao-di Herbs,National Resource Center for Chinese Materia Medica,China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China;3.Hunan Co-Innovation Center for Utilization of Botanical Functional Ingredients,Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China;4.Institute of Medicinal Plant Development Chinese Academy of Medical Sciences,Peking Union Medical College,Beijing 100193, China)

机构地区：[1]中国中医科学院博士后流动站,北京100700 [2]中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地,北京100700 [3]湖南农业大学湖南省植物功能成分利用协同创新中心,湖南长沙410128 [4]中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所,北京100193

出　　处：《中国中药杂志》

基　　金：国家自然科学基金青年基金项目(81603234);国家杰出青年科学基金项目(81325023);中央本级重大增减支项目(2060302)

年　　份：2018

卷　　号：43

期　　号：16

起止页码：3255-3262

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、EMBASE、IC、IPA、JST、PUBMED、RCCSE、RSC、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：罗汉果Siraitia grosvenorii属于葫芦科藤本植物，可作食药两用，其主要活性成分和甜味物质同为葫芦烷型四环三萜类甜苷物质。角鲨烯环氧酶（squalene epoxidase）被认为是三萜和植物甾醇合成中共有的限速酶，催化生成共同前体2，3-环氧角鲨烯；然而在甜苷的生物合成中，前体物质为2，3，22，23一双环氧角鲨烯。该文为了挖掘罗汉果中特有的鲨烯环氧酶基因，克隆了SgSQEl和SgSQE2基因，对其进行保守域、跨膜域等生物信息学分析，实时荧光定量PCR分析其表达模式，并在原核中异源表达，最后通过分子对接预测蛋白和底物之间是否存在相互作用，为甜苷合成中的鲨烯环氧酶基因功能研究提供依据。SgSQEl和SgSQE2基因均编码524个氨基酸，序列一致性为84％，但在N末端有较高的特异性。原核表达的融合蛋白为无活性的包涵体，这一现象可能由于跨膜结构引起。二者在果实中均有表达，SgSQE2表达较为稳定，而SgSQE1在15d表达丰度最高，与葫芦二烯醇合酶（cucurbitadienol synthase）具有完全一致的共表达模式。分子对接结果中SgSQEl和SgSQE2蛋白均能与配基2，3-氧化角鲨烯相互作用，作用位点为紧邻的氨基酸残基（R348，H349）。结果表明二者在罗汉果次生代谢产物合成中起鲨烯环氧酶的功能，推测SgSQEl更可能参与了甜苷的生物合成，SgSOE2在其他葫芦烷型化合物或植物甾醇中发挥作用。

关 键 词：罗汉果  角鲨烯环氧酶  表达分析  分子对接

分 类 号：Q943.2[植物生产类] S567]