文献类型：期刊文章

作　　者：杨硕[1] 李诗瑶[1] 王鸣秋[1] 刘艳[1] 徐芬[1] 邵翠翠[1] 张莉[1] 史玉敏[2] 胡冬立[3]

Yang Shuo;Li Shiyao;Wang Mingqiu;Liu Yan;Xu Fen;Shao Cuicui;Zhang Li;Shi Yumin;Hu Dongli(Hubei Provincial Institute of Food Supervision and Test,Wuhan,430000;School of Nuclear Technology and Chemistry ＆ Biology,Hubei Universi-ty of Science and Technology,Xianning,437100;Hubei provincial food and drug inspection center,Suizhou,441300)

机构地区：[1]湖北省食品质量安全监督检验研究院,武汉430000 [2]湖北科技学院核技术与化学生物学院,咸宁437100 [3]湖北省随州市食品药品监督检验检测中心,随州441300

出　　处：《基因组学与应用生物学》

基　　金：湖北省食品质量安全监督检验研究院自主立项科研项目(ZZLX2016009)资助

年　　份：2018

卷　　号：37

期　　号：10

起止页码：4511-4517

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2017_2018、JST、RCCSE、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：为建立市售椰子汁饮料产品中目的种源成分（椰子）和非目的种源成分（大豆、花生）的分子生物学检测鉴定方法。本研究代表性抽取了6批次市售主流品牌椰子植物蛋白汁饮料,提取各样本DNA,通过扩增基因组ITSⅡ片段验证核酸提取效果。之后利用PCR方法检测了样本中椰子种源成分并同时比较了椰子的稳定持家基因eEF1-α和UBC10扩增效果（Xia et al., 2014）,发现所有检测样本均可检出椰子成分,并且UBC1O基因更适用于椰子汁这类工业化产品的靶向扩增。另利用实时荧光PCR验证大豆、花生等的源性成分引物、探针特异性,发现6个种源间无交叉反应,无非特异性扩增曲线。在实际样本检测中,实时荧光PCR显示6份样本中无花生源性成分检出;3#和6#样本有大豆成分检出,Ct值分别为33.89和38.15,6#样本经重复实验分析无明显差异,表明在2份椰子汁中检出非目的种源—大豆。考虑到6#样本为弱阳性,故采用特异性、灵敏度更好的微滴式数字PCR （dd PCR）检测并验证前期结论,分析显示在实时荧光PCR中有扩增的2份样本中,3#样本检出大豆阳性微滴信号,6#则为阴性,其余4份样本dd PCR与实时荧光PCR一致,均为阴性。本次实验筛选了更适合扩增椰子植物蛋白饮料DNA的靶基因,建立了此类产品中2个种源鉴定的实时荧光PCR方法,并通过先进的dd PCR法对可疑结果进行验证的完整解决方案,最终避免了假阳性结论,判定这6份市售产品中有1份样本存在掺杂使假。这项工作为监管部门提供了有效的监管手段和技术支撑,将有助于进一步规范椰子汁市场和质量安全。

关 键 词：椰子汁植物蛋白饮料  种源成分鉴定  掺杂使假 微滴式数字PCR  UBC10  

分 类 号：TS255.44]