文献类型：期刊文章

作　　者：马素贞[1,2] 王涛[3,4] 龙慧玲[1] 国果[1] 杨阳[1] 常振策[1] 王兵[5] 吴建伟[1]

MA Suzhen;WANG Tao;LONG Huiling;GUO Guo;YANG Yang;CHANG Zhence;WANG Bing;WU Jianwei(Department of Parasitology,Guizhou Medical University,Guiyang 550025,Guizhou,China;Department of Microbiology,Guizhou Medical University,Guiyang 550025,Guizhou,China;Key Laboratory of Pathogenic Biology of Guizhou Higher Education Institutions,Guizhou Medical University,Guiyang 550025,Guizhou,China;Department of Biotechnology,Guizhou Medical University,Guiyang 550025,Guizhou,China)

机构地区：[1]贵州医科大学寄生虫学教研室,贵州贵阳550025 [2]贵州医科大学 [3]贵州医科大学微生物学教研室,贵州贵阳550025 [4]贵州医科大学贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室,贵州贵阳550025 [5]贵州医科大学生物技术教研室,贵州贵阳550025

出　　处：《贵州医科大学学报》

基　　金：国家自然科学基金项目(No81360254);贵阳市科技局-贵州医科大学联合基金(GY2015-23);国家科技支撑计划(2011BAC06B12)

年　　份：2018

卷　　号：43

期　　号：9

起止页码：997-1002

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:构建家蝇u93基因原核表达体系,检测重组表达产物的体外抗菌活性。方法:采用生物信息学方法,分析u93基因编码蛋白的理化特性;将前期构建的p ET29a-u93重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21/DE3中,以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白并通过SDS-PAGE对表达产物进行分析;纯化重组蛋白,采用微量稀释法检测u93重组蛋白的体外抗菌活性。结果:生物信息学分析显示,u93编码基因开放阅读框全长363 bp,共编码120个氨基酸,理论分子量为13. 35 k D,等电点为7. 52,信号肽位于1~20位氨基酸之间;u93重组蛋白在大肠杆菌BL21/DE3中主要以包涵体形式表达,重组蛋白的相对分子质量与理论值相一致; u93重组蛋白对白色念珠菌的最小抑菌浓度(MIC)为21 mg/L、对近平滑念珠菌MIC为12. 5 mg/L、对克柔念珠菌MIC为12. 5 mg/L、对热带念珠菌MIC为12. 5 mg/L,但不能抑制金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌的生长繁殖。结论:成功构建u93原核表达系统,重组表达的u93蛋白对念珠菌具有较强的抑杀活性。

关 键 词：家蝇 u93  基因 原核表达 抗菌活性

分 类 号：R384.2]