文献类型：期刊文章

作　　者：姬祥[1,2] 白欣煜[3] 刘国辉[4] 何金科[1,2] 张红梅[5] 曹旭东[2,6] 陈创夫[2]

JI Xiang;BAI Xin-yu;LIU Guo-hui;HE Jin-ke;ZHANG Hong-mei;CAO Xu-dong;CHEN Chuang-fu(College of Life Science,Shihezi University,Shihezi 832003,Xinjiang,China;West ern Region Collaborative Innovation Center for Prevention and Control of Infectious Diseases;Xinjiang Kashi District Tuberculosis Prevention and Control Center;Shihezi Economic and Technological Development Zone Hospital;The First Hospital affiliated with the Medical College of Shihezi University;Department of Pathogen Biology and Immunology,Medical College of Shihezi University)

机构地区：[1]石河子大学生命科学学院,新疆石河子832000 [2]西部地区高发人兽共患传染性疾病防治协同创新中心 [3]新疆喀什地区结核病防治所 [4]石河子经济技术开发区医院 [5]石河子大学医学院第一附属医院检验科 [6]石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室

出　　处：《中国病原生物学杂志》

基　　金：国家重大研发计划项目(No.2017YFD0500304)

年　　份：2018

卷　　号：13

期　　号：8

起止页码：859-864

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CSCD、CSCD_E2017_2018、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建结核分枝杆菌Ag85复合物原核表达载体并表达和纯化重组蛋白,评价该家族蛋白在结核病血清学诊断中的应用价值。方法以标准株H37Rv基因组为PCR模板扩增fbpA、fbpB及fbpC基因并克隆至原核表达载体,转化至C43(DE3)菌株后经诱导、表达、纯化获得重组蛋白Ag85A、Ag85B、Ag85C。分别以纯化蛋白包被酶标板,采用方阵滴定确定Ag85A、Ag85B、Ag85C蛋白间接ELISA的最佳条件,用优化的ELISA检测367份健康对照组血清及86份痰涂阳性结核病患者血清中的特异IgM、IgG抗体。结果成功构建Ag85复合物基因的重组质粒,经诱导表达获得Ag85A、Ag85B、Ag85C重组蛋白。分别以纯化的Ag85A、Ag85B、Ag85C为包被抗原,采用ELISA检测结核病人血清IgG抗体,灵敏度分别为65.1%、69.8%和41.8%,特异性分别为75.1%、78.1%和64.2%;以Ag85B+Ag85A或Ag85CIgG抗体阳性为判断标准,检测血清结核分枝杆菌IgG抗体的灵敏度为60.4%,特异性为86.1%。结论以Ag85B+Ag85A或Ag85C血清IgG抗体阳性为判断标准,检测血清结核分枝杆菌IgG抗体具有较好的灵敏度与特异性,可作为结核病血清学诊断方法。

关 键 词：结核分枝杆菌 Ag85复合物  蛋白表达 间接ELISA 血清学诊断

分 类 号：R378.911]