文献类型：期刊文章

作　　者：朱燕楠[1] 缪婷婷[1] 王伟[1] 陆忠奎[1] 刘劲峰[1] 王勇[1]

ZHU Yan-Nan;MIAO Ting-Ting;WANG Wei;LU Zhong-Kui;LIU Jin-Feng;WANG Yong(Department of Pathogen Biology,School of Basic Medical Sciences,Nanjing Medical University,Nanjing 211100,China)

机构地区：[1]南京医科大学基础医学院病原生物学系江苏省现代病原生物学重点实验室,江苏南京211100

出　　处：《寄生虫与医学昆虫学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81471573)

年　　份：2018

卷　　号：25

期　　号：2

起止页码：71-79

语　　种：中文

收录情况：BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、WOS、ZGKJHX、ZR、普通刊

摘　　要：为了探讨日本血吸虫成虫抗原(SWA)对LX-2细胞NLRP3炎症小体活化和纤维化相关基因表达的影响,以及活性氧(ROS)在其中的作用,本文首先采用不同浓度(0、25、50、100μg/m L)的SWA刺激LX-2细胞,通过实时荧光定量PCR (Real-time PCR)和Western blot检测细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、α-SMA和ColⅠ的基因和蛋白表达, ELISA检测细胞IL-1β的分泌水平;同时使用CCK-8 (Cell Counting Kit-8)法检测细胞活性,乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒检测细胞LDH的释放;流式细胞术检测SWA刺激对LX-2细胞中ROS产生的影响;之后使用ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)处理细胞,检测NLRP3、IL-1β、Caspase-1、α-SMA、ColⅠ基因和蛋白的表达水平。结果显示,当SWA的浓度达100μg/m L时,LX-2细胞内NLRP3、Caspase-1、IL-1β、α-SMA和ColⅠ的m RNA的表达与对照组相比均明显升高,同时相关蛋白的表达和IL-1β的分泌也显著升高。流式检测结果显示,SWA刺激LX-2细胞后能显著增加细胞内ROS的生成,并在NAC处理后,可见明显抑制细胞内ColⅠ和炎症小体活化相关的基因和蛋白的表达。结果提示,SWA可以诱导LX-2细胞内炎症小体活化和胶原表达,并且ROS反应可能在介导NLRP3活化中发挥重要的作用。

关 键 词：LX-2细胞  SWA  NLRP3炎症小体  ROS 肝纤维化

分 类 号：R532.21]