文献类型：期刊文章

作　　者：王金凤[1,2] 刘立兵[1,2] 耿云云[3] 石蕊寒[1,2] 孙晓霞[1,2] 南汇珠[1,2] 姜彦芬[1,2] 王建昌[1,2]

WANG Jin-feng;LIU Li-bing;GENG Yun-yun;SHI Rui-han;SUN Xiao-xia;NAN Hui-zhu;JIANG Yan-fen;WANG Jian-chang(Center of Inspection and Quarantine,Heibei Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Shijiazhuang 050000,China;Heibei Academy of Inspection and Quarantine,Shijiazhuang 050051,China;College of Life Science,Hebei Normal University,Shijiazhuang 050024,China)

机构地区：[1]河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心,河北石家庄050000 [2]河北省检验检疫科学技术研究院,河北石家庄050051 [3]河北师范大学生命科学学院,河北石家庄050024

出　　处：《现代食品科技》

基　　金：国家质量监督检验检疫总局科研项目(2016IK107);河北师范大学博士基金项目(130401)

年　　份：2018

卷　　号：34

期　　号：8

起止页码：213-218

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、EI、FSTA、IC、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：本研究旨在建立一种快速检测单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LM)的实时荧光重组酶聚合酶扩增(real-time RPA)方法。基于LMhly A基因保守序列,设计合成特异性RPA引物和exo探针,所建立的LM real-time RPA方法能够在37℃等温条件下20 min内完成扩增。该方法仅对LM基因组DNA为阳性扩增,对其它20种致病菌基因组DNA的扩增均为阴性;以LM纯培养菌液的基因组DNA进行10倍列梯度稀释,并以之作为模板,其灵敏性可达到5×10-1 pg,与实验室已建立的real-time PCR方法一致。人工污染实验中,对于LM接菌量为3 CFU/25 g的羊肉和生菜样品,增菌14 h即可通过建立的real-time RPA方法检出,与传统培养方法和real-time PCR检测结果均一致,但是前者所需时间明显少于后者。本文建立的LM real-time RPA方法特异性强,灵敏性高,操作简单,反应迅速,并能够摆脱对价格昂贵的荧光PCR仪和专业实验室的需求,可应用于食品突发事件中LM的现场快速检测,对保障我国食品安全具有重要意义。

关 键 词：单核细胞增生李斯特氏菌 REAL-TIME RPA hlyA基因  食品安全

分 类 号：TS207.4]