文献类型：期刊文章

作　　者：周湧超[1] 徐志刚[1] 杨澜[1] 陈新宇[2] 段志良[2] 文金生[1]

ZHOU Yongchao;XU Zhigang;YANG Lan;CHEN Xinyu;DUAN Zhiliang;WEN Jinsheng(Institute of Arboviruses,School of Basic Medical Sciences,Wenzhou Medical University,Wenzhou 325000;Department of Clinical Laboratory,Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University,Wenzhou 325027,China)

机构地区：[1]温州医科大学基础医学院虫媒病毒研究所,浙江温州325000 [2]温州医科大学附属第二医院检验科,浙江温州325027

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》

基　　金：国家自然科学基金(81501363);浙江省自然科学基金(LY17C010004);温州市科技计划项目(Y20150093)

年　　份：2018

卷　　号：34

期　　号：5

起止页码：462-468

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的制备肠道病毒71型(EV71)衣壳蛋白VP1特异性小鼠单克隆抗体(mAb)并检测其特异性。方法合成编码EV71-VP1的基因并克隆入原核表达质粒p ET21a;采用重组表达的VP1免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合并采用ELISA筛选可分泌抗VP1的m Ab的杂交瘤细胞株;将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔,采用蛋白G亲和层析法从腹水中纯化mAb,并采用SDS-PAGE和Western blot法检测m Ab的纯度和特异性;EV71感染Vero细胞,采用间接免疫荧光细胞化学染色和Western blot法评估所制备m Ab识别EV71的能力。结果成功表达了EV71-VP1,制备出了4株杂交瘤细胞(6E、8D、9F和10C),杂交瘤细胞所分泌的小鼠m Ab均可识别EV71。结论成功制备了小鼠抗EV71衣壳蛋白VP1的m Ab。

关 键 词：肠道病毒71型(EV71)  衣壳蛋白VP1  单克隆抗体(mAb)  

分 类 号：Q813.2[生物工程类] R512.5]