文献类型：期刊文章

作　　者：李岚[1] 史宣玲[2] 江立玮[2] 殷昌斌[1] 李家伟[1] 刘巍[1]

LI Lan;SHI Xuan-ling;JIANG Li-wei;YIN Chang-bin;LI Jia-wei;LIU Wei(Department of Laboratory Medicine,Beijing Luhe Hospital,Capital Medical University,Beijing 101149,China)

机构地区：[1]首都医科大学附属北京潞河医院检验科,北京101149 [2]清华大学医学院艾滋病综合研究中心,北京100084

出　　处：《中国病毒病杂志》

基　　金：北京市通州区科技计划项目(KJ2017CX039-14)

年　　份：2018

卷　　号：8

期　　号：3

起止页码：194-199

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSA、IC、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的制备具有抗HIV-1功能的抗人CD4单克隆抗体。方法构建人CD4真核表达质粒pcDNA3.1-hCD4,将该质粒DNA免疫BALB/c小鼠。免疫前血清作为阴性对照,通过HIV-1假病毒中和实验和ELISA方法检测多克隆抗体血清。通过杂交瘤技术制备鼠抗CD4单克隆抗体,HIV-1假病毒中和实验进行筛选。通过不同亚型假病毒中和实验和CD4D1D2蛋白ELISA方法分别检测腹水纯化单克隆抗体的中和活性和特异性结合力。结果 DNA免疫后第6周的多抗血清100倍稀释后对HIV-1假病毒的抑制率可达75%,第8周其抑制率可上升至95%。CD4D1D2蛋白ELISA结果显示,免疫后第4周多抗血清就显示出同CD4蛋白较强的特异性结合。共获得160余株对HIV-1假病毒B′、BC、AE亚型具有中和活性的单克隆抗体。选择其中中和活性较高的8株制备纯化腹水单抗,其中5株单抗IC50小于130μg/ml。ELISA检测结果显示腹水纯化单抗与CD4D1D2蛋白可以特异性结合。结论获得了具有抗HIV-1假病毒的抗CD4单克隆抗体。具有HIV-1广谱中和活性的抗CD4抗体可用于研发有效的被动免疫制剂,控制艾滋病传播。

关 键 词：人类免疫缺陷病毒Ⅰ型  CD4 DNA免疫 多克隆抗体  单克隆抗体 中和抗体

分 类 号：R512.91]