文献类型：期刊文章

作　　者：王玉林[1] 吕林林[2] 王霞[1] 高永清[1] 周兆[2] 刘革修[2] 王林静[1]

WANG Yu-lin;LV Lin-lin;WANG Xia;GAO Yong-qingx;ZHOU Zhao;LIU Ge-xiu;WANG Lin-jing(School of Public Health,Guangdong Pharmaceutical University,Guangzhou 510006,China;Institute of Hematology,Basic Medical College of Jinan University,Guangzhou 510632,China)

机构地区：[1]广东药学院公共卫生学院,广东广州510006 [2]暨南大学基础医学院血液学研究所,广东广州510632

出　　处：《中国病理生理杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81270568)

年　　份：2018

卷　　号：34

期　　号：6

起止页码：975-981

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:研究枸杞多糖(LBP)对过氧化氢(H_2O_2)诱导人内皮样细胞EA.hy926氧化损伤的作用及机制。方法:用H_2O_2建立EA.hy926细胞氧化损伤模型,细胞共分为5个组:正常对照(control)组、模型(damage)组(H_2O_2,50 mmol/L)、LBP(100 mg/L)组、抗损伤(anti-damage)组(50 mg/L、100 mg/L和200 mg/L LBP+50 mmol/L H_2O_2)和LY294002(20μmol/L)组。采用CCK-8法检测细胞的活力;用Annexin V/PI双染法流式细胞术检测不同处理后EA.hy926细胞的凋亡;吖啶橙(AO)/溴乙啶(EB)染色法观察细胞凋亡的形态特征;划痕法测定细胞的迁移能力;一氧化氮(NO)试剂盒检测细胞培养上清中NO的水平;用ELISA法测定血管内皮生长因子(VEGF)的水平;Western blot检测cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、内皮型NO合酶(eNOS)、p-eNOS和p-Akt的蛋白水平。结果:量效结果显示浓度为100 mg/L的LBP预处理EA.hy926细胞1 h,然后加入H_2O_2(50 mmol/L)处理24 h对减轻H_2O_2诱导的EA.hy926细胞损伤的作用最显著。与damage组比较,LBP预处理可提高EA.hy926细胞的活力(P<0.05),减少细胞凋亡(P<0.05),并促进细胞迁移;上清液中VEGF和NO水平升高;Bcl-2/Bax比率明显升高,下调cleaved caspase-3蛋白水平,并上调eNOS和p-eNOS蛋白水平。此外,加入PI3K抑制剂LY294002后,LBP对H_2O_2损伤的EA.hy926细胞的保护作用减弱,表现为NO水平和p-Akt蛋白水平降低。结论:LBP能减轻H_2O_2对EA.hy926细胞的损伤作用,缓解H_2O_2诱导的凋亡,其机制与激活PI3K/Akt/eNOS信号通路密切相关。

关 键 词：枸杞多糖 氧化应激 细胞活力 细胞凋亡  PI3K/Akt/eNOS信号通路  

分 类 号：R285.5[中药学类] R329.25[中医学类]