文献类型：期刊文章

作　　者：李丽丽[1] 黄琪[1] 彭代银[1] 吴德玲[1] 韩岚[1]

LI Li-li;HUANG Qi;PENG Dai-yin;WU De-ling;HAN Lan(Anhui Key Laboratory of Research and Development of Traditional Chinese Medicine,College of Pharmacy,Anhui University of Chinese Medicine,Hefei 230012,China)

机构地区：[1]安徽中医药大学药学院安徽省中药研究与开发重点实验室,安徽合肥230012

出　　处：《中草药》

基　　金：国家重点研发计划项目(2017YFC1701600);2018年度安徽高校科学研究重点项目:知母须根总皂苷抑制AD转基因秀丽隐杆线虫中β淀粉样蛋白毒性作用及机制研究(KJ2018A0298);安徽省高校科研创新平台团队建设项目:中药饮片产地加工与炮制一体化关键技术研究创新团队(2015TD035)

年　　份：2018

卷　　号：49

期　　号：13

起止页码：3087-3094

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2017_2018、EMBASE、IC、IPA、JST、RCCSE、RSC、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的优化知母须根总皂苷提取工艺,探讨其对糖氧剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的PC12细胞的保护作用。方法在单因素实验基础上,利用响应面法优化知母须根总皂苷提取工艺;建立OGD损伤的PC12细胞模型,采用终质量浓度为20、40、80 mg/L的知母须根总皂苷进行干预。分别用倒置显微镜观察细胞形态,MTT法测定细胞存活率,荧光探针二氯荧光素-双乙酸盐(DCF-DA)法测定细胞内活性氧(ROS)含量,Annexin V/PI双染法测定细胞凋亡率,蛋白免疫印记法检测凋亡信号蛋白Bcl-2、Bax表达情况。结果知母须根总皂苷提取的最优条件为乙醇体积分数72.22%,料液比1∶11,提取时间73.33 min,在此条件下,理论提取率为8.38%,实测提取率为8.33%。PC12细胞经OGD损伤4 h后细胞活力显著降低,知母须根总皂苷对其呈现保护作用,并随着知母须根总皂苷质量浓度的升高而增强;流式细胞术分析结果表明知母须根总皂苷能明显减少OGD损伤PC12细胞中ROS含量及凋亡率,免疫印迹实验结果表明知母须根总皂苷可上调PC12细胞Bcl-2表达并下调Bax表达。结论通过响应面法优化的工艺得率高、提取效果好。知母须根总皂苷对OGD损伤的PC12细胞具有一定的保护作用,其机制可能与减少OGD诱导PC12细胞ROS含量、抑制线粒体凋亡通路有关。

关 键 词：知母须根  总皂苷 响应面优化 PC12细胞 OGD损伤  细胞凋亡  

分 类 号：R285.5[中药学类]