文献类型：期刊文章

作　　者：卓灵剑[1] 郑健雄[1] 李杰[1] 杨运平[1] 张萍[1] 廖华[2] 胡稷杰[1]

Zhuo Lingjian;Zheng Jianxiong;Li Jie;Yang Yunping;Zhang Ping;Liao Hua;Hu Jifie(Department of Orthopaedics and Traumatology,Nanfang Hospital,Southern Medical University,Guangzhou 510515,China;Department of Anatomy,Guangdong Provincial Key Laboratory of Construction and Detection in Tissue Engineering,Southern Medical University,Guangzhou 510515,Chin)

机构地区：[1]南方医科大学南方医院创伤骨科,广州510515 [2]南方医科大学基础医学院人体解剖学教研室广东省组织构建与检测重点实验室,广州510515

出　　处：《中华创伤骨科杂志》

基　　金：广东省自然科学基金（2014A030313278）;南方医院院长基金（20158002）;南方医院院级教育课题（15NJ-YB05）

年　　份：2018

卷　　号：20

期　　号：7

起止页码：611-616

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的体外研究验证小鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）中Laspl蛋白及铁蛋白在骨形态发生蛋白2（BMP2）介导成骨中的机制。方法从3-18个月龄的C57BL／6J小鼠体内分离、纯化出MSCs，并传代至第3代后，分为3组：实验组的高糖培养基内加入100μg／L的BMP2及成骨诱导液，阳性对照组加入单纯的成骨诱导液，空白对照组不做处理。3组分别诱导7、14、21d，并采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测4个成骨相关标记基因：Runt相关转录因子2、骨钙素、Osterix蛋白、骨桥素，以确认是否分化成骨。确认成骨后，采用蛋白印迹法检测成骨结果阳性组细胞中的Laspl蛋白及铁蛋白各自的表达浓度。以慢病毒转染基因沉默技术下调小鼠MSCs的Laspl蛋白的基因表达，并重新进行BMP2介导的诱导成骨过程，再进行上述成骨标志基因的RT-qPCR检测。结果RT-qPCR过程显示实验组和阳性对照组显示诱导成骨，且实验组诱导成骨效果更佳。蛋白印迹法检测结果显示仅实验组中的Laspl蛋白明显表达量下调而铁蛋白表达量明显上调。采用慢病毒转染基因沉默技术下调Laspl蛋白表达量后，成骨相关基因表达量明显上调。结论BMP2可以介导小鼠MSCs诱导成骨，且成骨诱导效果极佳。结合前期研究，我们可以确认Laspl蛋白及铁蛋白参与调控BMP2的信号通路，且Laspl蛋白对BMP2介导的诱导成骨呈抑制作用。

关 键 词：骨形态发生蛋白质类 铁蛋白质类  成骨细胞  间质干细胞  

分 类 号：R68]