文献类型：期刊文章

作　　者：王冠丽[1] 袁红敏[2] 王珍凤[1] 宗贝贝[1] 叶阳[1] 张军[1] 张海龙[1]

WANG Guan-li;YUAN Hong-min;WANG Zhen-feng;ZONG Bei-bei;YE Yang;ZHANG Jun;ZHANG Hai-long(Henan Key Laboratory of Cellular and Molecular Immunology,Joint National Laboratory for Antibody Drug Engineering,Henan University,Kaifeng 475004,China;Department of Thyroid Breast Surgery,Huaihe Hospital,Henan University,Kaifeng 475004,China)

机构地区：[1]河南大学抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室河南省细胞与分子免疫重点实验室,开封475004 [2]河南大学淮河医院乳腺甲状腺外科,开封475004

出　　处：《四川大学学报（医学版）》

基　　金：国家自然科学基金面上项目(No.81670271)资助

年　　份：2018

卷　　号：49

期　　号：4

起止页码：512-517

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的观察尿酸处理下大鼠心肌细胞系H9C2的损伤和NLRP3炎性小体的活化情况,探讨可溶性尿酸活化NLRP3炎性小体的机制。方法采用不同质量浓度的尿酸处理H9C2 12h、24h和48h,通过MTS和乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞活力,以反映细胞损伤情况,同时采用流式细胞术(FCM)分析H9C2凋亡情况。通过Western blot检测NLRP3炎性小体相关分子[NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和Caspase-1]的蛋白水平。分离线粒体和胞质,Western blot检测细胞色素C的释放情况,评价线粒体损伤情况。MTS和LDH检测活性氧(ROS)抑制剂N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)对细胞活力的影响,real time-PCR及Western blot检测NAC对NLRP3炎性小体活化的改善情况。最后采用Western blot和免疫荧光检测解偶联蛋白2(UCP2)蛋白的表达。结果随着尿酸浓度的增加,细胞损伤和凋亡加剧,且具有时间依赖性;尿酸可上调NLRP3炎性小体相关分子的表达,并导致线粒体受损;NAC可改善细胞损伤并抑制NLRP3炎性小体相关mRNA和蛋白的活化;尿酸还可下调UCP2的表达。结论尿酸下调UCP2蛋白的表达,诱导线粒体损伤,激活NLRP3炎性小体,导致心肌细胞损伤。

关 键 词：可溶性尿酸  解偶联蛋白2 NLRP3炎性小体  心肌细胞损伤

分 类 号：R392]