文献类型：期刊文章

作　　者：姜辰龙[1] 严秀文[1] 张日腾[2] 李勇[2] 姜平[2] 白娟[2]

JIANG Chen-long;YAN Xiu-wen;ZHANG Ri-teng;LI Yong;JIANG Ping;BAI Juan(Key Laboratory of Zoology of Life Sciences 210095, China;Key Laboratory of Animal Nanjing Agricultural University, Nanjing Bacteriology of Ministry of Agriculture, College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China)

机构地区：[1]南京农业大学生命科学学院,南京210095 [2]南京农业大学动物医学院农业部动物细菌学重点实验室,南京210095

出　　处：《畜牧兽医学报》

基　　金：国家自然科学基金(31672565;31502082);中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(KJQN201616);国家生猪现代产业体系建设专项(CARS-36)

年　　份：2018

卷　　号：49

期　　号：6

起止页码：1314-1319

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2017_2018、EMBASE、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：为快速诊断和检测猪圆环病毒3型(PCV3),本研究根据其ORF2基因保守序列,设计特异性引物,并通过Bst DNA聚合酶、引物最佳浓度比例、Mg^(2+)、dNTPs和甜菜碱浓度及反应条件优化,建立了环介导等温核酸扩增(LAMP)检测方法。结果显示,59℃恒温扩增36min即可出现梯形条带,且产物亦可通过SYBR GreenⅠ染色进行判断。该方法最低检测限为1.0×10~1copies·μL^(-1),与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)及猪圆环病毒1型和2型(PCV1、PCV2)等均无交叉反应。检测68份呼吸道病猪淋巴结样品,PCV3阳性率占30.9%,与PCR检测结果符合率为95.6%(65/68)。相对传统PCR方法而言,该方法敏感特异,简便快速,可用于PCV3检测和临床诊断。

关 键 词：猪圆环病毒3型  RT-LAMP 检测  

分 类 号：S852.659.2]