文献类型：期刊文章

作　　者：张晖[1] 黄峥兰[1] 黄宁姝[1] 王腾[1] 冯文莉[1]

Zhang Hui;Huang Zhenglan;Huang Ningshu;Wang Teng;Feng Wenli(Key Laboratory of Medical Diagnostics of Ministry of Education, Faculty of Laboratory Medicine, Chongqing Medical University, Chongqing, 400016)

机构地区：[1]重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室

出　　处：《基因组学与应用生物学》

基　　金：教育部高等学校博士学科点专项科研基金(No.201255031105)资助

年　　份：2018

卷　　号：37

期　　号：5

起止页码：2157-2163

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2017_2018、JST、RCCSE、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：慢性粒细胞白血病（慢粒）急变期的治疗是目前的重要问题,临床上亟需要找到新的分子治疗靶点。本研究使用基因集群富集分析软件（gene set enrichment analysis,GSEA）分析基因表达综合数据库（gene expression omnibus,GEO）中慢粒临床样本及小鼠细胞模型的基因表达谱数据,获得与慢粒急变期相关的基因集群,然后从中选择丝氨酸蛋白酶抑制剂家族成员B2（SERPINB2）作为研究对象。应用分子克隆技术在空载质粒p Adtrack-CMV的基础上构建p Adtrack-CMV-SERPINB2重组质粒,使用电穿孔方法将上述质粒分别转入慢粒细胞系K562细胞,运用细胞免疫荧光技术检测SERPINB2在细胞内的表达与分布,采用CCK-8实验和克隆形成实验检测细胞增殖和克隆形成能力,使用流式细胞术检测细胞周期,通过Western blotting实验检测SERPINB2、BCR/ABL以及RB1的表达。结果表明,成功构建了p Adtrack-CMV-SERPINB2并转入K562细胞,细胞免疫荧光实验显示SERPINB2主要在细胞浆中分布。与对照组相比,在K562细胞中过表达SERPINB2可轻微抑制K562细胞的增殖（p〈0.001）,明显降低K562细胞的克隆形成能力（p〈0.01）并导致G0/G1期的细胞比例增多（p〈0.001）。Western blotting显示BCR/ABL表达无明显变化,SERPINB2、RB1表达水平增高。综上所述,SERPINB2可通过上调细胞内RB1的水平,使细胞周期更多的停留在G1期,从而对K562细胞的增殖与克隆形成能力产生抑制作用。

关 键 词：慢性粒细胞性白血病 基因表达谱 SERPINB2  K562细胞

分 类 号：R733.7]