文献类型：期刊文章

作　　者：庞建虎[1] 乔龙亮[1] 黄海龙[1] 党晨阳[1] 朱鹏[1,2] 徐继林[1]

PANG Jian-Hu;QIAO Long-Liang;HUANG Hai-Long;DANG Chen-Yang;ZHU Peng;XU Ji-Lin(School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China;Ningbo Institute of Oceanography, Ningbo 315832, China)

机构地区：[1]宁波大学海洋学院,宁波315211 [2]宁波海洋研究院,宁波315832

出　　处：《农业生物技术学报》

基　　金：国家现代农业产业技术体系建设专项资金(No.CARS-47);宁波市科技攻关项目(No.2017C110003);浙江省公益技术应用研究(No.2017C33133);宁波大学添路职业发展基金学生培育项目

年　　份：2018

卷　　号：26

期　　号：6

起止页码：1056-1063

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2017_2018、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：鳗利斯顿氏菌(Listonella anguillarum)是一种常见的病原体,能感染多种养殖动物,每年给水产养殖业带来巨大的经济损失。随着集约化养殖模式在水产养殖业的大规模应用,水产病原体的传播速度也大幅度提高。为此,迫切需要建立一种快速、准确的检测技术。本研究以鳗利斯顿氏菌的金属蛋白酶基因(zinc metalloprotease gene,emp A)为靶基因,设计多对引物和1条exo探针,通过优化反应体系和条件,建立了一种基于重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术的快速实时检测鳗利斯顿氏菌的方法。结果表明,建立的Real-time RPA检测技术能够在20 min内特异地检测出鳗利斯顿氏菌,与其他7种常见水产致病菌均不发生交叉反应。该检测方法最低能够检测出1 pg/μL鳗利斯顿氏菌基因组模板,对人工污染的样品最低检测限为3.4×10~2CFU/m L,且重复性良好。因此,利用本研究建立的Real-time RPA检测技术,能特异、准确、高效地检测出鳗利斯顿氏菌,而且操作简单、耗时短,为水产养殖中鳗利斯顿氏菌的快速诊断及商业试剂盒的开发提供科学依据和技术参考。

关 键 词：鳗利斯顿氏菌 RPA 检测  金属蛋白酶基因(empA)  

分 类 号：S943]