文献类型：期刊文章

作　　者：王新旺[1,4] 周乐斌[2] 梅劲[2] 张德明[3] 刘丹[1] 杜奥玲[1] 陈胜华[1]

WANG Xin-wang;ZHOU Le-bin;MEI Jin;ZHANG De-ming;LIU Dan;DU Ao-ling;CHEN Sheng-hua(Clinical Anatomy ＆ Reproductive Medicine Application Institute, Medical college, University of South China, Hengyang 421001, Hunan Province, China;Department of Anatomy, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325035, Zhejiang Province, China;College of Mechanical Engineering, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China;Troops 69250 of the PLA, Urumqi 830000, China)

机构地区：[1]南华大学医学院应用解剖与生殖医学研究所,湖南衡阳421001 [2]温州医科大学解剖学教研室,浙江温州325035 [3]浙江大学机械工程学院,杭州310058 [4]中国人民解放军69250部队,乌鲁木齐830000

出　　处：《中国临床解剖学杂志》

基　　金：国家自然科学基金项目(80215086)

年　　份：2018

卷　　号：36

期　　号：2

起止页码：174-181

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CSCD、CSCD2017_2018、JST、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的灌注制备家猪、新西兰白兔、SD大鼠肾去细胞生物支架,探究三种肾支架对共培养种子细胞HEK的影响。方法取健康成年家猪10头、新西兰白兔28只、SD大鼠28只,分别将取出的肾脏随机均等分为正常组和支架组,支架组由肾动脉依次灌入肝素、1%Triton X-100和1%SDS溶液完成去细胞化。两组肾分别作组织形态学鉴定并检测机械力学性质。去细胞支架作组织爬片与人胚肾上皮细胞共培养,观察细胞在支架爬片上的生长状况,免疫荧光检测人胚肾上皮细胞PCNA及DAPI表达量作灰度分析。结果家猪、新西兰白兔、SD大鼠肾脏经灌注去细胞后HE核染色阴性,Masson染色显示胶原蛋白阳性,Collagen I和Collagen IV荧光染色阳性,电镜扫描可见去细胞支架内蜂窝状孔洞结构,并可见典型的肾小球龛样结构;支架组弹性模量与正常组肾弹性模量差异无显著性,支架组PCNA/DAPI值均高于空白对照组,而三种支架组之间PCNA/DAPI值无显著性差异。结论本研究灌注去细胞方法可去除家猪、新西兰白兔、SD大鼠肾内的细胞及细胞核,保留细胞外基质,维持细胞外基质的三维空间结构和机械力学强度,是一种可靠有效的制备三者肾去细胞生物支架方法,灌注制备的去细胞支架均可提高异种共培养人胚肾上皮细胞HEK的增殖活性,且这种提高作用在家猪、新西兰白兔和SD大鼠之间并无物种差异性。

关 键 词：去细胞 生物支架 肾再生  共培养 组织工程  

分 类 号：R318.5[生物医学工程类]