文献类型：期刊文章

作　　者：黄碧君[1,2] 黄艳[2] 胡红琴[2] 郭占云[1]

HUANG Bi-jun , HUANG Yan, HU Hong-qin, GUO Zhan-yun(Institute of Protein, School of Life Sciences and Technology, Tonal University, Shanghai 200092, Chin)

机构地区：[1]同济大学生命科学与技术学院蛋白质研究所,上海200092 [2]苏州康宁杰瑞生物科技有限公司,江苏苏州215125

出　　处：《中国生物制品学杂志》

年　　份：2018

卷　　号：31

期　　号：3

起止页码：287-293

语　　种：中文

收录情况：AJ、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2017_2018、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的建立利用毛细管电泳法测定重组人源化免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)纯度的方法,并进行优化和验证。方法采用单因素法,对稀释液、碘乙酰胺浓度(非还原条件)、加热方式、进样电压、进样时间、分离电压、样品盘和卡盒温度进行多水平优化,并利用优化的方法测定IgG2的纯度。以峰面积对样品加样量进行线性回归,确定该方法的线性范围,并对该方法进行精密度、准确度及溶液稳定性验证。结果最佳电泳条件为:选用超纯水作为稀释液,250 mmol/L碘乙酰胺(非还原条件),70℃干热10 min,进样电压为5 kV,进样时间为30 s,分离电压为15 kV,样品盘和卡盒温度为20℃。在优化的色谱条件下,在还原条件下,IgG2纯度检测的线性范围为50~150μg,相关系数为0.998,重复性的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.14%,中间精密度的RSD为0.24%,且20℃放置13 h稳定;在非还原条件下,IgG2纯度检测的线性范围为50~150μg,相关系数为0.999,重复性的RSD为0.36%,中间精密度的RSD为0.16%,且20℃放置13 h稳定。结论该方法线性关系良好,且精密度、准确度、灵敏度较高,测定结果稳定可靠,适用于重组人源化IgG2的纯度分析。

关 键 词：免疫球蛋白G 纯度 毛细管电泳法

分 类 号：O657.8]