文献类型：期刊文章

作　　者：胡冰心[1] 叶健斌[1] 邱晓媚[2] 林彦青[1] 吴丹琳[1] 温俊杰[1] 罗美群[1] 宁立军[1] 李妍[1] 宁云山[1]

HU Bingxin1, YE Jianbin1, QIU Xiaomei2, LIN Yanqing1, WU Danlin1, WEN Junjie1, LUO Meiqun1, NING Lijun1, LI Yan1, NING Yunshan1(1.Biotherapy Institute, School of Laboratory Medicine and Biotechnology, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China; 2Zhuhai SMU Biomedicine Public Service Platform, Zhuhai 519090, Chin)

机构地区：[1]南方医科大学检验与生物技术学院生物治疗研究所,广东广州510515 [2]珠海南医大生物医药公共服务平台有限公司,广东珠海519090

出　　处：《南方医科大学学报》

基　　金：国家自然科学基金(81470831);国家自然科学基金-联合项目(U1401223);广东省科技计划项目(2013B090800036;2015A040404021;2016B090919019);广东省大学生创新创业项目(201512121122);广东省大学生创新训练项目(201612121100;201612121243;201612121034)~~

年　　份：2018

卷　　号：38

期　　号：1

起止页码：14-19

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建人全长DLL3的真核表达质粒,并分析上调和下调DLL3对人胃癌细胞增殖的影响。方法采用PCR扩增人全长DLL3基因并克隆至真核表达载体pCMV-Tag4中,通过酶切及测序鉴定后,瞬时转染HEK293T细胞,并以转染pCMV-Tag4质粒和无转染HEK293T细胞分别为阴性对照和空白对照,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot鉴定人全长DLL3基因的表达;进一步通过qRT-PCR和Western blot检测人DLL3在人正常口腔上皮细胞GES-1和AGS等3株胃癌细胞中的表达差异;当人DLL3/pCMV-Tag4瞬时转染3株胃癌细胞后,利用MTT检测DLL3过表达后胃癌细胞的增殖;同时,特异性人DLL3si RNA转染人胃癌细胞MGC803和MKN45,利用MTT检测DLL3下调后胃癌细胞的增殖。结果成功构建了人全长DLL3/pCMV-Tag4重组质粒,转染HEK293T细胞24 h后,qRT-PCR和Western blot表明DLL3在m RNA和蛋白水平上的表达显著高于对照组;MTT细胞增殖实验显示:过表达DLL3促进胃癌细胞的增殖,下调DLL3后抑制胃癌细胞的增殖。结论成功构建了人全长DLL3/pCMV-Tag4真核表达质粒并在HEK293T细胞中获得表达,过表达DLL3促进胃癌细胞的增殖,下调DLL3抑制胃癌细胞的增殖,本研究为以DLL3为新靶点对胃癌进行靶向治疗提供新思路。

关 键 词：人DLL3  真核表达 胃癌细胞 增殖

分 类 号：R735.2]