文献类型：期刊文章

作　　者：王金斌[1,2] 白蓝[1] 李文[3] 张俊沛[1] 王荣谈[4] 吴文慧[2] 唐雪明[1,2,3]

机构地区：[1]上海市农业科学院生物技术研究所,上海201106 [2]上海海洋大学食品学院,上海200090 [3]上海市农业遗传育种重点实验室,上海201106 [4]上海瑞丰农业科技有限公司,上海201106

出　　处：《核农学报》

基　　金：闵行区产学研合作计划项目(2016MH256)

年　　份：2018

卷　　号：32

期　　号：3

起止页码：506-514

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为获得肉制品中牛、羊、猪、鸡、鸭等动物源性成分的快速高效多重PCR检测方法,利用5对牛、羊、猪、鸭和鸡等动物源性成分特异性PCR引物(靶基因序列来源于线粒体基因组),对多重PCR反应条件引物浓度和退火温度进行优化,并确定该检测方法的检出限。结果表明,多重PCR方法最佳反应条件为鸭源特异性引物浓度0.12μmol·L^(-1),鸡源特异性引物浓度0.16μmol·L^(-1),猪源特异性引物浓度0.16μmol·L^(-1),羊源特异性引物浓度0.32μmol·L^(-1),牛源特异性引物浓度0.24μmol·L^(-1),退火温度58℃,d NTPs浓度0.20 mmol·L^(-1),Taq DNA聚合酶添加量5 U,循环次数40。在最佳反应条件下,所建立的牛、羊、猪、鸡和鸭等5种动物源性成分多重PCR的g DNA检出限达到20 pg。应用优化后的多重PCR方法对21份市售肉制品样本进行盲样检测,验证鉴别方法的准确性,结果与现行标准的检测结果一致,掺假率达42.86%。本试验结果为肉制品中该5种动物源性成分的快速检测提供了技术支撑。

关 键 词：动物源性成分 五重PCR  优化  检出限

分 类 号：TS251.7]