文献类型：期刊文章

作　　者：李卓亚[1] 王杰[1] 田康明[2] 董自星[1,2] 金鹏[2] 刘晓光[2] 王正祥[1,2]

机构地区：[1]天津科技大学生物工程学院与工业发酵微生物教育部重点实验室,天津300457 [2]天津科技大学化工与材料学院生物化工系,天津300457

出　　处：《食品工业科技》

年　　份：2018

卷　　号：39

期　　号：5

起止页码：94-100

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2017_2018、FSTA、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为了构建高产丁二酸的重组大肠杆菌,以删除了乙酸激酶和磷酸乙酰转移酶基因(ackA-pta)、乳酸脱氢酶基因(ldhA)和丙酮酸甲酸裂解酶基因(pflB)的大肠杆菌CICIM B0013-025为出发菌株,将其磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(ppc)基因的启动子替换为温度诱导的λ噬菌体启动子P_L-P_R,获得温度调控型的丁二酸合成菌株B0013-026。继而通过发酵条件优化,建立了两阶段发酵法:菌株的生长温度和诱导温度分别为37和42℃,以甘油为碳源并添加入5 g/L蛋白胨,发酵产酸阶段在微供氧(100 r/min)条件下进行。在5 L发酵罐中采用最优条件进行发酵,丁二酸的产量、生产强度和甘油转化率分别为62.5 g/L、1.04 g/(L·h)和64.2%,而且发酵液中仅有少量的α-酮戊二酸(3.0 g/L)和乙酸(1.8 g/L)等副产物积累,实现了以甘油为唯一碳源高效合成丁二酸,为其工业化生产提供了重要参考。

关 键 词：丁二酸 大肠杆菌 温敏型启动子  磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 两阶段发酵法  

分 类 号：TS201.1]