文献类型：期刊文章

作　　者：霍本念[1] 刘洁[1] 王薛[1] 张婷[1] 刘梦楠[1] 冯涛[1]

机构地区：[1]重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,基础医学院生物化学与分子生物研究中心,重庆400016

出　　处：《第三军医大学学报》

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81201679;81071770)~~

年　　份：2018

卷　　号：40

期　　号：5

起止页码：406-414

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2017_2018、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建将乙肝病毒X(hepatitis B virus X,HBx)基因导入小鼠肝脏内的动物模型,探讨HBx蛋白对小鼠体内肝前体细胞凋亡与分化的影响。方法从小鼠肝门静脉注射携带HBx基因的肝前体细胞和生理盐水,于第30、60、90、120天收取小鼠肝前体细胞标本,通过RT-PCR和Western blot验证HBx基因在肝前体细胞中的表达;通过荧光显微镜、免疫组织化学染色法、RT-PCR检测细胞株是否到达小鼠肝脏并表达目的基因;使用TUNEL-FITC/DAPI法、RT-PCR和Western blot检测肝前体细胞的凋亡和分化情况。结果携带了HBx基因的肝前体细胞株成功到达小鼠肝脏内并表达HBx蛋白,TUNEL-FITC/DAPI法显示HBx显著抑制小鼠肝前体细胞发生凋亡,RT-PCR和Western blot结果显示,抗凋亡蛋白Bcl2、Mcl-1的表达上调,促凋亡蛋白Bax的表达下调,细胞分化早期指标CK19表达增加,而细胞晚期分化指标CK18表达降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 HBx蛋白在小鼠体内可以抑制肝前体细胞凋亡和分化成熟,诱发肝癌发生的早期事件。

关 键 词：乙肝病毒X蛋白 肝前体细胞 凋亡 分化 动物模型  

分 类 号：R322.47] R329.28[基础医学类]