文献类型：期刊文章

作　　者：岳锋[1] 杨健[1] 周娟娟[1] 朱艳平[1] 李鹏[1] 孙国鹏[1] 张艳芳[1] 王选年[1]

机构地区：[1]新乡学院生命科学技术学院生物技术研究中心,河南新乡453003

出　　处：《中国兽医杂志》

基　　金：国家自然科学基金(31672540);河南省高等学校重点科研项目(17A230019);新乡学院博士启动科研项目(1366020053)

年　　份：2017

卷　　号：53

期　　号：12

起止页码：31-33

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、RCCSE、核心刊

摘　　要：制备猪程序性死亡因子-1(PD-1)单克隆抗体,鉴定其生物学特性。以表达纯化的猪程序性死亡因子-1(Programmed death-1,PD-1)胞外区重组蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,用细胞杂交瘤技术将免疫BALB/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS0细胞融合,经多次克隆化培养,筛选分泌特异性抗猪PD-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。结果:获得1株可稳定分泌抗猪PD-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株2B5,Ig亚型为Ig G1,细胞上清和腹水效价分别为1∶1×212和1∶2.048×105,酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和Western-Blot结果表明,该株单抗能特异性识别重组猪PD-1胞外区蛋白,流式细胞术结果表明,该单抗可以结合猪外周血单核细胞上PD-1蛋白。结论:成功制备了1株分泌抗猪PD-1单抗的杂交瘤细胞株2B5,为研究猪PD-1/PD-L1通路在猪传染性疾病中的致病机制提供了有力的检测工具。

关 键 词：PD-1 胞外区 单克隆抗体 效价

分 类 号：S851]