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草鱼核因子E2相关因子2基因克隆分析及其对呼吸爆发的调控作用
Cloning and analysis of nuclear factor E2-related factor 2(Nrf2) and its function in the regulation of respiratory burst in grass carp(Ctenopharyngodon idella)
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]华中农业大学水产学院,淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心,池塘健康养殖湖北省工程实验室,农业部淡水生物繁育重点实验室,湖北武汉430070 [2]仲恺农业工程学院动物科技学院,广州市水产病害与水禽养殖重点实验室,广东广州510225
基 金:国家自然科学基金(31502199,31572657,31372563); 广东省海洋与渔业局基金(A201512C003,2015-115); 湖北省科技支撑计划(2015BBA228,YSF2015000255); 武汉市科技局资助课题(2016020101010089); 中央高校基本科研业务费专项(2014PY035)
年 份:2018
卷 号:42
期 号:2
起止页码:161-177
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2017_2018、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:呼吸爆发过程可以产生大量的活性氧,核因子E2相关因子2(Nrf2)在此过程中起着重要作用。实验克隆和分析了草鱼的Nrf2基因,随后制备了Nrf2蛋白的多克隆抗体,研究了其和呼吸爆发的关系。草鱼Nrf2基因cDNA长度为1994 bp,开放阅读框为1782 bp,编码593个氨基酸(aa)。氨基酸序列比对发现,草鱼Nrf2基因与鲤的同源性最高,为87%;草鱼Nrf2基因含有6个进化过程中保守的Neh[Nrf2-Epoxy chloropropane(ECH)homology]区。实时定量PCR(q RT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测结果表明,Nrf2基因在检测的草鱼8个组织中均有表达。Nrf2激活剂叔丁基对苯二酚(t BHQ)处理草鱼肾细胞(CIK)后,CIK细胞总抗氧化能力显著上调,产生的活性氧下调,Nrf2及其下游的HO-1和GST基因的m RNA表达上调。Western blot和免疫荧光(IF)检测结果表明,t BHQ处理CIK后,Nrf2的蛋白表达也上调,并伴随着入细胞核现象。研究表明,保守的草鱼Nrf2基因在机体中广泛表达,能通过上调自身及其下游抗氧化基因的表达下调细胞活性氧的产生,从而参与调控呼吸爆发过程。
关 键 词:草鱼 核因子E2相关因子2(Nrf2) 基因克隆 多克隆抗体制备 呼吸爆发
分 类 号:Q785] S917.4[水产类]
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