文献类型：期刊文章

作　　者：林雨虹[1,2] 林怡婷[1,2] 周琳琳[2] 张秋玉[1,2]

机构地区：[1]福建医科大学基础医学院免疫学系,福州350108 [2]福建医科大学免疫治疗研究所,福州350108

出　　处：《现代免疫学》

基　　金：福建省自然科学基金(2017J01525);福建省卫生教育联合攻关计划项目(WKJ2016-2-31)

年　　份：2018

卷　　号：38

期　　号：1

起止页码：19-24

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD_E2017_2018、JST、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为构建人B7H4基因启动子荧光素酶报告基因载体,以人外周血单个核细胞基因组DNA为模板,PCR扩增3条不同长度人B7H4启动子序列,并插入PGL3-Basic荧光素酶报告基因载体中;待测序验证后,将3个重组质粒及pRL-TK内参质粒分别共转染HEK-293T细胞,采用双荧光素酶报告基因系统检测其启动子活性。测序结果显示构建的3个人B7H4基因启动子重组载体序列正确;重组载体转染HEK-293T细胞,经双荧光素酶报告基因检测确定重组载体有启动子活性,其中PGL3-hB7H4-0.5kb重组载体的转录活性较高。本研究成功构建了3条含不同长度的B7H4启动子序列的荧光素酶报告基因系统,为后续分析人B7H4启动子的转录调控元件及肿瘤微环境中调控B7H4表达的作用因素等研究奠定了实验基础。

关 键 词：B7H4  启动子 荧光素酶报告基因 载体构建  

分 类 号：R392.2]