文献类型：期刊文章

作　　者：韦学雷[1] 梁青青[1] 曹贝贝[1] 张君涛[1] 韩丽[1] 兰培英[1,2] 胡慧[1,2]

机构地区：[1]河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002 [2]河南省动物性食品安全重点实验室,河南郑州450002

出　　处：《中国兽医学报》

基　　金：国家重点研发计划资助项目(2016YFD0500102);河南省科技开放合作资助项目(152106000047)

年　　份：2018

卷　　号：38

期　　号：1

起止页码：11-16

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2017_2018、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：猪Delta冠状病毒（PDcoV）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）均是能引起仔猪腹泻的冠状病毒，通过临床症状和剖检很难鉴别诊断，建立同时检测且能够鉴别诊断这3种疾病的快速检测方法对于临床诊断具有重要的意义。参照GenBank中登录的PDCoV，NPEDVM和TGEVN基因的基因序列，利用Primer5．0设计合成3对能扩增特异性目的片段的引物，构建重组质粒，并对RT-PCR反应条件进行优化，建立了检测PDCoV，PEDV和TGEV的多重RT—PCR诊断方法，并对所建立的方法进行敏感性、特异性和重复性分析。利用该方法对河南176份临床样品进行检测，并与普通RT-PCR检测方法对该检测方法进行比较分析。结果表明，所建立的三重RT-PCR方法对PDCoV的最低检测量是3．14×10 3拷贝／uL；PEDV的最低检测量是3．88×10 4拷贝／uL和TGEV的最低检测量是3．68×10 4拷贝／uL。所建立的方法具有较好的特异性，对猪博卡病毒（PboV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟（CSFV）和猪圆环病毒（PCV）等猪常见病毒的扩增结果均为阴性。应用所建立的三重RT-PCR方法对176份临床收集的仔猪腹泻样品进行PEDV，PDCoV和TGEV检测，并将检测结果和单重RT-PCR检测方法比较，结果显示，多重RT—PCR检测结果与常规单一RT～PCR的结果符合率均为100％。综上，本试验建立了能同时检测PDCoV，PEDV和TGEV的三重RT—PCR方法，为临床上这3种疫病的快速检测和流行病学调查奠定了基础。

关 键 词：猪Delta冠状病毒  猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 多重RT—PCR方法  

分 类 号：S852.65]