文献类型：期刊文章

作　　者：王涛[1] 王超楠[2] 张红[2] 温娟娟[1] 张斌[2]

机构地区：[1]天津师范大学生命科学学院,天津300387 [2]天津科润蔬菜研究所,蔬菜种质创新国家重点实验室,天津市蔬菜遗传育种企业重点实验室,天津300381

出　　处：《华北农学报》

基　　金：国家重点研发计划项目(2017YFD0101801);天津市自然科学基金项目(16JCYBJC29300);国家重点研发计划项目(2016YFD0101701);天津市现代农业产业技术体系创新团队建设专项计划(ITTVRS2017003);国家大宗蔬菜产业技术体系(CARS-25-G-02);天津市科技计划项目(16PTSYJC00260)

年　　份：2017

卷　　号：32

期　　号：6

起止页码：67-72

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CSCD、CSCD2017_2018、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：快速高效的DNA提取是作物大规模分子育种的关键一步。旨为构建一种快速提取大白菜基因组DNA的方法,以大白菜叶片为试验材料,比较了CTAB法、二步CTAB法以及4种碱裂解法提取DNA的质量,分析了不同方法提取的DNA为模板的PCR扩增效果,还对不同方法提取的基因组DNA的保存时间和保存条件进行了比较,选择最优的方法在抗根肿病基因分子标记辅助选择中进行了应用。结果表明,CTAB法和3种碱裂解法提取的基因组DNA作为模板的PCR扩增产物,都可以通过8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测到清晰的条带。其中碱裂解法Ⅲ,不仅提取质量好,而且提取过程简单、快速,能够满足大白菜高通量DNA提取的需要,提取的DNA在4℃和-20℃的条件下保存,将保存至30 d的基因组DNA作为模板进行PCR扩增,产物仍然可以通过聚丙烯酰胺凝胶电泳检测到清晰的条带,说明这种方法保存时间较长,经验证,该方法在抗根肿病基因分子标记辅助选择中的应用效果也较好。碱裂解法Ⅲ显著提高了大白菜分子标记辅助筛选的效率,可广泛应用于大白菜分子标记辅助选择育种。

关 键 词：大白菜 基因组DNA 快速提取  

分 类 号：S634.1]