文献类型：期刊文章

作　　者：冯琳[1,2] 李润乐[1] 刘川川[1] 廖瑜[1] 杨全余[1] 汤锋[1,3]

FENG Lin;LI Run-le;LIU Chuan-chuanI;LIAO Yu;YANG Quan-yu;TANG Feng(Research Center for High Altitude Medicine, Qinghai University, Xining 810001;Clinical medicine of Medical college, Qinghai University, Xining 810016;High Altitude Zoonosis Research Center, Qinghai University, Xining 810001)

机构地区：[1]青海大学医学院高原医学研究中心,青海西宁810001 [2]青海大学医学院临床医学系,青海西宁810001 [3]青海大学高原人畜共患病研究所,青海西宁810001

出　　处：《中国高原医学与生物学杂志》

基　　金：青海省科技厅项目(2015-ZJ-745;2014-ZJ-716);青海省重大科技专项(2016-SF-A5)

年　　份：2017

卷　　号：38

期　　号：4

起止页码：235-241

语　　种：中文

收录情况：CAS、普通刊

摘　　要：目的建立多房棘球蚴表面抗原EMY162原核表达系统及制备兔多克隆抗体。方法构建表达载体pCzn1-EMY162并转入Arctic Express菌株,用IPTG诱导、Ni柱纯化获得目的蛋白后免疫新西兰兔,以ELISA、SDS-PAGE考察纯化后抗体的效价、浓度及纯度。结果酶切鉴定和测序结果表明重组质粒pCzn1-EMY162构建成功,且EMY162在包涵体部位中表达、可溶部位微量表达。通过Ni-NTA柱亲和层析纯化获得高纯度的EMY162蛋白。免疫兔后收集血清,其ELISA结果表明,抗血清可以特异性结合目标蛋白,抗体效价大于512 K,SDS-PAGE结果表明,纯化后获得了较高纯度的多克隆抗体,可用于后续实验研究。结论成功建立EMY162原核表达系统并制备了高纯度、高效价的多克隆抗体。

关 键 词：EMY162  多房棘球蚴 多克隆抗体 原核表达

分 类 号：R535]