期刊文章详细信息
免疫磁珠分离-实时荧光PCR快速检测虾中沙门氏菌 ( EI收录)
Rapid Detection of Salmonella in Shrimp by Immunomagnetic Separation Combined with Real-time PCR
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州510640 [2]宁波检验检疫科学技术研究院,浙江宁波315012 [3]广东海洋大学食品科技学院,广东湛江524094
基 金:广东省自然科学基金项目(2016A030313449);广东省科技计划项目(2015A030401025);浙江省自然科学基金项目(LY16H260004);广东省省部产学研合作重大专项(2013A090100014)
年 份:2017
卷 号:33
期 号:11
起止页码:235-242
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、EI、IC、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、UPD、ZGKJHX、核心刊
摘 要:建立了免疫磁珠分离(Immunomagnetic separation,IMS)联合实时荧光PCR(real time PCR)快速、灵敏地检测虾中沙门氏菌的方法。用纳米磁珠与抗沙门氏菌多克隆抗体制备免疫磁珠,优化反应条件,建立IMS方法。同时针对沙门氏菌ttr基因合成探针和引物,构建real time PCR体系,选4株代表性的沙门氏菌检测其特异性和灵敏度。结果显示,免疫磁珠的最适添加量为100μL,免疫磁珠与样品菌液的最佳反应时间为30 min。建立的免疫磁珠分离-实时荧光PCR(IMS-real time PCR)方法特异性高,对于虾中沙门氏菌的检测限为鼠伤寒沙门氏菌5×10~1 CFU/25 g,猪霍乱沙门氏菌5×10~2 CFU/25 g,肠炎沙门氏菌和甲型副伤寒沙门氏菌1×10~2CFU/25 g,检测全程可在6 h内完成。对40份实际样品,IMS-real time PCR方法与国标法检测结果完全一致。建立的IMS-Real time PCR方法用时短、灵敏度高,为水产品中沙门氏菌的快速检测提供了技术支撑,对沙门氏菌引起的食源性疾病的预防和控制具有现实意义。
关 键 词:免疫磁珠分离 实时荧光PCR 沙门氏菌 检测
分 类 号:TS254.7]
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