文献类型：期刊文章

作　　者：康迁[1] 黄荣[2] 冯亚岚[2] 皮光环[1] 杨健[2]

KANG Qian;HUANG Rong;FENG Ya-lan;PI Guang-huan;YANG Jian(Pediatrics, North Sichuan Medical College Hospital, Nanchong, Sichuan 637000, China;Experimental Teaching Center for Pathogens and Immunology, School of Basic Medical Sciences, North Sichuan Medical College)

机构地区：[1]川北医学院附属医院儿科,四川南充637000 [2]川北医学院基础医学院病原生物学与免疫学实验教学中心

出　　处：《中国病原生物学杂志》

基　　金：四川省教育厅项目(No.15ZA0205)

年　　份：2017

卷　　号：12

期　　号：10

起止页码：934-938

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CSCD、CSCD_E2017_2018、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的制备EPEC粘附素IntiminC280抗血清,检测其中和EPEC对Hep-2细胞粘附作用。方法用基因克隆技术构建IntiminC280表达载体pET32(α)-intiminC280,转化表达宿主菌BL21,用IPTG诱导His-IntiminC280融合蛋白的表达,SDS-PAGE分析其表达形式;用NI柱亲和层析法纯化融合蛋白,并辅以佐剂免疫家兔,4次免疫后采血,分离血清,对流免疫电泳法检测抗血清效价;以该抗血清作为一抗,采用Western blot检测EPEC粘附素Intimin的表达;用不同稀释度的抗血清中和EPEC,显微镜下观察细菌被中和后对Hep-2细胞的粘附情况。结果成功构建BL21/pET32(α)-intiminC280原核表达系统,表达蛋白的分子质量单位为50ku,与预期相符。用纯化的His-IntiminC280免疫家兔获得高效价抗血清,16倍稀释后仍能有效抑制EPEC对Hep-2细胞的粘附。结论 IntiminC280抗血清具有抑制是EPEC粘附Hep-2细胞作用,可作为EPEC疫苗研发的备选抗原。

关 键 词：肠致病性大肠埃希菌 紧密素  抗血清 粘附

分 类 号：R378.21]