文献类型：期刊文章

作　　者：林彦青[1] 邱晓媚[2] 叶健斌[1] 胡冰心[1] 李妍[1] 宁云山[1]

机构地区：[1]南方医科大学检验与生物技术学院生物治疗研究所,广东广州510515 [2]珠海南医大生物医药公共服务平台有限公司,广东珠海519090

出　　处：《暨南大学学报（自然科学与医学版）》

基　　金：国家自然科学基金项目(81470831);国家自然科学基金-广东省联合基金重点项目(U1401223);国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2014AA020909);广东省科技计划-创新载体建设项目(2013B090800036);广东省科技计划项目(2015A040404021;2016B090919019);广东省大学生创新创业项目(201512121122);广东省大学生创新训练项目(201612121100;201612121243;201612121034;201612121246)

年　　份：2017

卷　　号：38

期　　号：5

起止页码：373-379

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD_E2017_2018、JST、MR、PROQUEST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZMATH、核心刊

摘　　要：目的:克隆人全长Notch1基因,构建人全长Notch1/p CMV6-Entry真核重组质粒并在HEK293 T细胞中进行瞬时表达.方法:采用PCR公知不认方法扩增人全长Notch1基因并克隆到真核表达载体p CMV6-Entry中并用限制性内切酶分析和DNA测序鉴定重组质粒.将该重组质粒转染HEK293 T细胞24h后,通过实时荧光定量PCR(q-PCR)和Western blot检测鉴定人全长Notch1的表达.结果:成功构建了人Notch1/p CMV6-Entry重组真核表达质粒,人全长Notch1基因在mRNA和蛋白水平上的表达显著高于p CMV6-Entry载体对照组和HEK293 T细胞对照组.结论:克隆获得人全长Notch1基因并验证在HEK293 T细胞中表达.

关 键 词：NOTCH信号通路 真核表达 NOTCH1 pCMV6-Entry  

分 类 号：Q291]