文献类型：期刊文章

作　　者：刘超[1] 任丽莉[2] 王一曌[1] 刘乙蒙[1] 肖建英[3]

LIU Chao REN Li-li WANG Yi-zhao LIU Yi-meng XIAO Jlan-ylng(Department of Developmental Biology Neurobiology Teaching Affairs Department of Jinzhou Medical University, Liaoning Jinzhou 121001, China)

机构地区：[1]锦州医科大学基础医学院发育生物学教研室,辽宁锦州121001 [2]锦州医科大学基础医学院神经生物学教研室,辽宁锦州121001 [3]锦州医科大学教务处,辽宁锦州121001

出　　处：《解剖学报》

基　　金：国家自然科学基金(81270698;31371173;81401199);辽宁省科学技术计划项目(2015020697)

年　　份：2017

卷　　号：48

期　　号：5

起止页码：545-549

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨活化蛋白激酶C受体1C(RACK1,GNB2L1)在胃癌细胞HGC27中的表达及过表达RACK1对HGC27生长增殖的影响。方法体外培养胃癌未分化细胞HGC27和正常胃黏膜上皮细胞系GES-1,收集细胞48 h后,提取mRNA和蛋白,利用RT-PCR检测RACK1 mRNA在HGC27和GES-1细胞中的表达;利用Western blotting法检测RACK1蛋白在两种细胞中的表达;以人胚肾HEK293细胞c DNA为模板,构建pc DNA3.1Aflag-RACK1重组质粒,利用Lipo2000转染入HGC27细胞中,Western blotting法检测质粒的转染效率,MTT法检测过表达RACK1对HGC27胃癌细胞系生长增殖的影响。结果 HGC27胃癌细胞中RACK1的mRNA和蛋白水平表达低于GES-1细胞(P<0.01)。双酶切鉴定和测序分析表明,pc DNA3.1A-flag-RACK1重组质粒构建成功。将该质粒转入HGC27细胞后,与未转染组相比,空载转染组RACK1蛋白表达无明显区别(P>0.05),pc DNA3.1-RACK1转染组RACK1蛋白表达明显升高(P<0.01);转染pc DNA3.1A-flag-RACK1转染组细胞存活率在72 h和96 h明显少于pc DNA3.1空载对照组(P<0.01)。结论支架蛋白RACK1的mRNA和蛋白水平在HGC27细胞中低表达,上调RACK1的表达可明显抑制HGC27细胞增殖。

关 键 词：蛋白激酶1活化受体  胃癌细胞 增殖 HGC27细胞  免疫印迹法

分 类 号：Q132]