文献类型：期刊文章

作　　者：陈智[1] 王博[2] 裘玫[3] 林圣云[2] 熊昊[1]

机构地区：[1]华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院小儿血液肿瘤科,武汉430016 [2]浙江中医药大学附属第一医院血液科,杭州310006 [3]湖北中医药大学中医临床学院伤寒教研室,武汉430061

出　　处：《中国药学杂志》

年　　份：2017

卷　　号：52

期　　号：17

起止页码：1503-1509

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的研究对香豆酸组合物(total coumarins of Hedyotis diffusa,TCHD)对急性髓系白血病(AML)细胞的增殖抑制作用及其机制。方法采用乙醇回流法提取TCHD,超高效液相色谱串联质谱系统(UPLC-MS/MS)检测其纯度。用不同浓度的TCHD(0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 mg·mL^(-1)),作用于对数生长期的Kasumi-1细胞、KG-1细胞、THP-1细胞、U937细胞和K562细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各细胞增殖;作用于Kasumi-1细胞24 h后,采用AnnexinⅤ/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况;运用流式细胞术检测药物作用后Kasumi-1细胞周期阻滞情况;Western blot法检测PARP、caspase-3、caspase-9、caspase-8蛋白活性的变化;以及CDK4/6、cyclin D_1、CDK2、p-CDK2、cyclin E、p21等细胞周期相关蛋白的变化。结果 TCHD在一定浓度范围内对AML细胞增殖有明显的抑制作用,对Kasumi-1、KG-1、THP-1、U937和K562细胞的IC_(50)(24 h vs 48 h)分别为0.077 vs 0.059(mg·mL^(-1))、0.083 vs 0.067(mg·mL^(-1))、0.096 vs 0.072(mg·mL^(-1))、0.087 vs 0.064(mg·mL^(-1))、0.096 vs 0.068(mg·mL^(-1)),对Kasumi-1的抑制作用表现最明显,并且呈时间-浓度依赖性(r=0.357,P<0.05)。不同浓度(0,0.02,0.04,0.06,0.08,0.10 mg·mL^(-1))的TCHD作用于Kasumi-1细胞株24 h后,凋亡率分别是(5.33±0.41)%、(7.99±0.45)%、(10.22±0.32)%、(20.10±1.99)%、(28.66±0.67)%和(33.24±2.12)%。0.02~0.06 mg·mL^(-1)的TCHD处理Kasumi-1细胞24 h后用流式细胞术检测到该细胞G_0/G_1期的比例依次为(51.43±3.21)%、(62.91±2.35)%和(76.42±4.14)%,与空白对照组[(35.8±5.25)%]比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。Western blot结果显示,不同浓度的TCHD能浓度依耐性激活caspase-8(P<0.01)、caspase-9、caspase-3和PARP(其余P<0.05),促进细胞色素C的表达;显著下调cyclin E、CDK6、CDK2、p-CDK2、cyclin D_1,和上调p21(P<0.01)。结论 TCHD抑制白血病细胞株Kasumi-1的增殖呈时间浓度依赖性,其凋亡机制一方面与其激活caspase-3、caspase-9�

关 键 词：急性髓系白血病 对香豆酸组合物  细胞凋亡  细胞周期

分 类 号：R965]