文献类型：期刊文章

作　　者：何宛芹[1] 付瑶[1] 鲁雯璐[1] 常小丽[1] 杨文钰[1]

机构地区：[1]四川农业大学农学院,四川省作物带状复合种植工程技术研究中心,成都611130

出　　处：《植物保护学报》

基　　金：四川省科技支撑项目(2015NZ0040);四川农业大学创新性实验项目(1510626033)

年　　份：2017

卷　　号：44

期　　号：4

起止页码：609-616

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为建立大豆根腐病镰孢菌的多重PCR检测方法,以四川大豆根腐病致病菌包括尖孢镰孢菌、腐皮镰孢菌、禾谷镰刀菌和木贼镰孢菌为对象,设计镰孢菌翻译延伸因子基因EF-1α的种特异引物,建立多重PCR扩增体系,并进行优化与验证。结果表明:25μL体系为最优镰孢菌多重PCR扩增体系,4种镰孢菌等体积混合DNA 4.0μL,各镰孢菌特异正向引物1.0μL,共用反向引物4.0μL,最佳退火温度为54℃,当循环30次时,能清晰地扩增出各镰孢菌EF-1α条带,对4种镰孢菌混合DNA的检测灵敏度可达0.1 ng/μL。室内环境样本验证结果表明,依据EF-1α扩增片段大小,该体系能够特异地检测出大豆黄化苗与致病镰孢菌混合样本中的镰孢菌,但无法从其它真菌的DNA中扩增获得目的片段。表明基于EF-1α基因特异引物建立的镰孢菌多重PCR检测技术可快速、特异地检测大豆根腐病镰孢菌。

关 键 词：大豆根腐病 镰孢菌 多重PCR 翻译延伸因子基因  病原菌鉴定

分 类 号：S435.651]