文献类型：期刊文章

作　　者：袁敏[1] 葛伟娜[1] 王莉[1] 张岚[1] 张家琦[1]

机构地区：[1]华北理工大学生命科学学院基因组学与计算生物学研究中心,河北唐山063000

出　　处：《华北农学报》

基　　金：国家自然科学基金项目(31401212);河北省自然科学基金项目(C2014209134);唐山市科技局项目(15140202a)

年　　份：2017

卷　　号：32

期　　号：4

起止页码：37-41

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CSCD、CSCD2017_2018、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为了获得纯化的SnRK1.1与FD蛋白,分析蛋白激酶SnRK1.1是否能够磷酸化开花调控途径中的转录因子FD,成功克隆了1 608 bp的SnRK1.1基因以及858 bp的FD与FD-T282A基因,分别与PGEX-4T-3载体连接,获得原核表达载体GST-SnRK1.1、GST-FD和GST-FD-T282A,并分别转化大肠杆菌BL21菌株;SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色(CBB)表明,0.5 mmol/L IPTG能够成功诱导出GST-SnRK1.1、GST-FD和GST-FD-T282A蛋白。利用GST纯化介质纯化获得了84 k Da的GST-SnRK1.1蛋白以及58 k Da的GST-FD与GST-FD-T282A融合蛋白;利用体外磷酸化体系证实SnRK1.1能够磷酸化FD,不能磷酸化突变的FD-T282A。研究结果为进一步解析SnRK1.1通过磷酸化转录因子FD参与开花途径调控的机制奠定了良好的基础。

关 键 词：SnRK1.1  FD 蛋白激酶 转录因子 磷酸化

分 类 号：Q71] Q78